新型纳米防黏连材料的制备及动物实验研究

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目的:采用静电纺丝技术制备聚乙二醇-聚β羟基丁酸与戊酸酯纳米纤维膜、聚乳酸纳米纤维膜和壳聚糖-聚乙二醇纳米纤维膜,通过腹腔黏连动物模型,对比观察所制备的纳米纤维膜材料预防术后腹腔黏连的作用。  材料和方法:应用扫描电镜对制备的材料进行表征检测,并通过体内实验检测材料的毒性。在成功制备纳米膜材料后,进行动物实验。动物实验选用雄性SD大鼠64只,采用盲肠刮伤法制造大鼠腹腔黏连动物模型,随机将动物分为对照组(A组)、聚乙二醇-聚β羟基丁酸与戊酸酯纳米纤维膜组(B组)、聚乳酸纳米纤维膜组(C组)和壳聚糖-聚乙二醇纳米纤维膜组(D组)。在关腹前,B组、C组和D组创面分别用聚乙二醇-聚β羟基丁酸与戊酸酯纳米纤维膜、聚乳酸纳米纤维膜与壳聚糖-聚乙二醇纳米纤维膜覆盖,对照组创面不做处理。分别于术后2周、4周处死大鼠,行大体、光镜及电镜观察,取肠浆膜黏连组织,应用ELISA法测定各黏连组织中羟脯氨酸(Hyp)的表达,应用免疫组化方法检测黏连组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)的表达水平。  结果:三种纳米纤维膜可以很容易的粘附到损伤的腹膜表面和盲肠浆膜表面,逐渐被机体降解。术后各时间点,实验组黏连分级程度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),C组(聚乳酸纳米纤维膜组)黏连的程度和发生率均低于B组与D组,但是实验组(B、C、D组)之间差异无统计学意义。光镜检查发现对照组纤维组织增生及炎性反应程度较实验组活跃。扫描电镜下见实验组创面修复情况优于对照组。术后2周和4周,B组、C组和D组黏连组织处MMP-2的表达较对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05),而对照组黏连组织处TIMP-2表达水平较三个实验组高,差异有统计学意义(P<0.05)。术后4周,实验组MMP-2表达较2周时下降,TIMP-2表达较2周时升高,差异无统计学意义(P>0.05)。术后各时间点,各实验组之间黏连肠段中Hyp表达差异无统计学意义(P>0.05),但各实验组黏连肠段中Hyp表达低于对照组(P<0.05),而且,各时间点Hyp表达水平的变化趋势与相应时间点腹腔黏连程度分级结果相一致。  结论:三种纳米纤维膜均为生物可吸收降解高分子材料,均可降低大鼠术后腹腔黏连的发生率和黏连程度。聚乳酸纳米纤维膜可以引起更轻微的纤维化和炎症反应,较聚乙二醇-聚β羟基丁酸与戊酸酯纳米纤维膜和壳聚糖-聚乙二醇纳米纤维膜更优。
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