利用重组DNA技术检测MJD1基因CAG三核苷酸重复及SCA3/MJD产前诊断研究

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背景遗传性脊髓小脑性共济失调(spinocerebellar ataxias,SCAs)是一组具有高度临床和遗传异质性的神经系统退行性疾病。患者多于中青年发病,临床上以小脑性共济失调为主要特征,还可伴有眼球运动障碍、视神经萎缩、视网膜色素变性、锥体束征、锥体外系表现、肌萎缩等表现,多呈常染色体显性遗传(autosomal dominant,AD)。目前常染色体显性SCA至少有28种基因型,其中18种亚型的致病基因已被克隆,包括SCA1、SCA2、MJD1、PLEKHG4、SPTBN2、CACNA1A、SCA7、ATXN8OS、ATXN10、TTBK2、PPP2R2B、KCNC3、PRKCG、ITPR1、CNTN4、TBP、FGF14及DRPLA。在已克隆的基因中,MJD1基因是SCA3/MJD的致病基因,其4号外显子区存在一段CAG重复序列,正常人重复12-40次,患者常见的异常重复为51-86次。因此准确、直观确定其CAG三核苷酸重复次数是从分子遗传学方面确诊SCA3/MJD的关键。目的运用重组DNA技术建立准确、直观检测MJD1基因CAG三核苷酸重复的技术平台;运用该技术进行35例SCA3/MJD患者的基因诊断和中国大陆地区首例SCA3/MJD产前诊断。方法运用重组DNA技术完成中国大陆地区35例SCA3/MJD患者和10例正常人的MJD1基因CAG三核苷酸重复进行检测及中国大陆地区首例SCA3/MJD产前诊断。结果运用重组DNA技术对35例SCA3/MJD患者和10例正常人的MJD1基因CAG三核苷酸重复进行检测,准确直观的检测出患者MJD1基因CAG三核苷酸重复,重复范围为65-81次,平均重复次数为73次。在SCA3/MJD患者MJD1基因CAG三核苷酸重复序列中发现CAG/CAA及CAG/TAG的多态变化。在产前诊断研究中,成功检测出该SCA家系先证者、先证者父亲及先证者所孕之胎儿的MJD1基因CAG三核苷酸重复次数分别为81次、74次、79次,完成产前诊断并证明MJD1基因CAG三核苷酸重复代间传递的不稳定性在父系遗传比母系遗传显著。结论①.建立了准确、直观检测MJD1基因CAG三核苷酸重复次数的技术平台。②.完成了中国大陆地区首例SCA3/MJD产前诊断研究。
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