低温敏感型面包酵母的选育及其应用的研究

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本文对低温敏感型面包酵母的选育、应用及遗传学分析进行了研究。 以酿酒酵母单倍体A13-18为出发菌株,通过紫外线诱变,选育出了低温敏感型突变株Css-14。确定了酿酒酵母(S.cerevisiae)低温敏感型菌株(Cold-sensitive strain)的初筛方法。实验证明,以YPG培养基为下层、以染料软琼脂培养基为上层的双层平板,是有效的低温敏感型菌株的初筛平板;将酿酒酵母在含抗霉素A的YPD培养基中10℃培养36h后,用制霉菌素处理菌体,能够达到杀死亲株、浓缩突变株的目的。 以发酵性能优良的商业面包酵母Y-3和低温敏感型酿酒酵母单倍体Css-14为亲株,采用电诱导原生质体融合技术,选育出了C型(cold-sensitive)融合子F6—2。该融合子在30℃发酵性能优于亲株面包酵母Y-3,在4℃贮藏6d不发酵,经连续传代15代后,遗传性状稳定。 通过耐酒精实验,选育出了F型(frozen-tolerant)面包酵母X-003,并对其耐冷冻性能进行了研究。结果表明,X-003经3w冷冻保藏后,存活率仍保持在80%以上。 应用实验表明,采用冷冻面团工艺制作面包,低温敏感型面包酵母F6-2和X-003质量优于五种普通商业面包酵母。 将低温敏感型酿酒酵母单倍体Css-14(a接合型)与普通酿酒酵母单倍体YNN-27(α接合型)进行群体杂交,对杂交子代进行遗传学分析。结果表明杂交子代基因重组率为50%,低温敏感型与接合型基因不连锁。
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