缓释催产激素对金鱼生殖机能的影响

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鱼类的生理活动受到下丘丘脑-垂体-性腺轴的调控,下丘脑分泌促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)和其他一些神经内分泌因子,激发脑垂体促性腺激素(gonadotropic hormone,GtH)的分泌,它刺激性腺产生性类固醇激素,从而促使性腺发育成熟、排出精子和卵子。然而,鱼类神经内分泌因子的产生和排放受到外界环境因子变动的影响。人工养殖的鱼类通常不能自行繁殖,其主要原因就是由于环境条件变化影响脑垂体不能大量分泌产生GtH。近年来,随着养殖规模的扩大,给予激素缓释制剂(sustained-release delivery systems,SRDS)成为诱导因驯养而导致性腺发育不良鱼类性成熟和生殖的方法之一。本文应用海藻酸钠和壳聚糖为缓释制剂的基质,制作了LHRHA-缓释制剂和HCG缓释制剂,并就缓释制剂的基质、LHRHA-缓释制剂和HCG缓释制剂对金鱼进行了腹腔埋植,通过对鱼类的基础生物学:性腺指数(GSI)、肝重指数(HSI),鱼类血清睾酮(T)、雌二醇(E2)水平,鱼类生殖生长相关基因mRNA在性腺中的相对表达量的检测,评价了海藻酸钠和壳聚糖两种材料作为缓释制剂的基质的性能,为生产实践提供指导、为新型缓释制剂的开发提供理论依据。1、缓释制剂对金鱼基础生物学的影响不含有激素缓释的海藻酸钠微球和壳聚糖微球对雌性和雄性金鱼GSI在埋植后48d内没有产生显著性的差异,且两种材料埋植后的变化趋势均与对照组表现出一致性;雌性和雄性金鱼HSI在缓释基质埋植后均未与对照组出现显著性差异,在整个实验周期内,HSI呈现出上升的趋势。LHRHA-海藻酸钠微球、LHRHA壳聚糖微球、HCG-海藻酸钠微球、HCG-壳聚糖微球在实验周期内变化趋势相同,均呈现先升高后下降的变化趋势。缓释制剂对金鱼埋植后对GSI的影响在21d-30d不等,但均较一次性激素埋植组的作用时间长,且对雌性和雄性金鱼产生的作用趋势相同;缓释制剂对雌性和雄性金鱼的肝重指数均没有与对照组产生显著性的影响,缓释制剂埋植后,HSI呈现出不断升高的趋势。2、缓释制剂对金鱼血清激素水平的影响海藻酸钠微球和壳聚糖微球埋植后,雌性和雄性金鱼血清中睾酮(T)和雌二醇(E2)与对照组没有产生显著性差异,整个实验期间血清激素呈现下降的趋势,最小值出现在埋植后21d或者30d。LHRHA-缓释制剂、HCG缓释制剂对雌性金鱼和雄性金鱼的影响呈现出相似的变化趋势。在埋植后均呈现出先升高后下降的变化趋势,较对照组具有显著性的差异且缓释制剂对雌雄金鱼的影响的时间要较一次性激素埋植组要长。缓释制剂埋植组金鱼血清睾酮(T)和雌二醇(E2)最高值多出现在缓释制剂埋植后第14-21d。3、缓释制剂对金鱼发育繁殖相关基因mRNA表达量的影响未载药的海藻酸钠微球和壳聚糖微球埋植后,雌性和雄性金鱼性腺中CYP19A基因mRNA的相对表达量均未与对照组表现出显著性差异,实验过程中的变化趋势一致;埋植海藻酸钠微球后,雌性金鱼性腺中GH基因mRNA的相对表达量未与对照组表现出显著性差异。埋植壳聚糖微球后,雌性金鱼性腺中GH基因mRNA(?)勺相对表达量在埋植后0-30d内显著高于对照组;雄性金鱼中性腺中GH基因mRNA的相对表达量在海藻酸钠微球和壳聚糖微球埋植后各样品采集时间点均未与对照组产生显著性差异。LHRHA-缓释制剂、HCG-缓释制剂对雌性和雄性金鱼的影响呈现出相似的变化趋势,且与血清中激素含量表现出一定的相关性。各处理组在埋植后均呈现出先升高后下降的变化趋势,且与对照组表现出显著性的差异。激素缓释制剂对金鱼性腺中CYP19A基因和ERα基因作用时间较一次性激素埋植的作用时间长。相关指标的检测结果说明:缓释催产激素能够对鱼体起到催产的效果,且不会影响鱼体正常的生长。对于鱼体的作用效果较未进行缓释的激素表现出显著的持久性和稳定性。
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