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鸡大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的一种常见多发病,是危害养殖业的重要传染病,常造成巨大的经济损失。我国目前养殖业中,抗生素的不合理或不正当使用导致细菌耐药的问题日益严峻。氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星作为动物专用药,在防治动物感染大肠杆菌病中有着重要作用。但是CLSI上并没有氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星对大肠杆菌的折点标准。而敏感性判断标准的缺乏,严重影响了对这三种药物耐药性监测的开展。因此,为了更好地分析耐药现状,监测耐药性产生和研究其发展规律,更科学地指导临床用药和新药开发,本研究参考CLSI中流行病学折点的建立方法,建立氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星对大肠杆菌的流行病学折点。本研究通过CLSI推荐的二倍琼脂稀释法,测定从广东省各地(广州、佛山、江门、云浮、茂名)养殖场和兽医站分离得到的363株鸡呼吸道源大肠杆菌对氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星三种动物专用药物的最小抑菌浓度(MIC),将所有菌株的MIC值进行统计并绘制出分布直方图。分别利用Normalized Resistance Interpretation(NRI)、ECOFFinder和统计学方法建立氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星对鸡呼吸道源大肠杆菌的流行病学折点,最终得出了氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星对鸡呼吸道源大肠杆菌的流行病学折点分别为≤16μg/m、≤16μg/ml和≤0.125μg/ml。分析其药敏试验结果,发现363株鸡呼吸道源大肠杆菌对氟苯尼考耐药率为66.7%(242/363),对安普霉素的耐药率为22.3%(81/363),对达氟沙星的耐药率为92.3%(335/363)。通过PCR检测菌株中的相关耐药基因floR、aac(3)-IV和PMQR基因和QRDR靶位基因发现,对于氟苯尼考,在流行病学折点范围内(≤16μg/ml)的菌株均不携带floR;对于安普霉素,在流行病学折点范围内(≤16μg/ml)的菌株均不携带aac(3)-IV;对于达氟沙星,在流行病学折点范围内(≤0.125μg/ml)的菌株,QRDR靶位基因未发生突变,PMQR中的qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、aac-(6’)-Ib-cr、qepA、oqxB均无检出,但qnrS在MIC=0.06μg/ml的菌株有少数的检出。耐药基因的检出情况基本与得出的流行病学折点吻合。在CLSI和EUCAST缺乏敏感性评判标准的情况下,建立流行病学折点,可以直观的识别非野生型菌株的出现,有利于耐药性监测工作的开展。