混合菌的构建及其对硝基苯的好氧生物降解

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本论文研究的目的是考察三株硝基苯降解菌降解硝基苯的特性;利用三株硝基苯降解菌构建混合菌,考察混合菌处理硝基苯废水的降解特性,并结合固定化技术对混合菌进行了吸附固定化研究;针对实际工业废水高冲击负荷和水力负荷、高盐度以及与其他有机物共存的特点,对该混合菌的实际应用前景进行了初步评估。选取DW-22型聚氨酯泡沫载体对1#、2#和3#菌进行固定化。三株固定化菌降解硝基苯的条件为:载体投加量均为5.1 mg/ml;温度:30℃、30℃和25℃;pH均为7.0;摇床转速均为150 r/min;接种量分别为:6 mg/L、10 mg/L和6 mg/L。与游离菌相比,固定化菌的耐热性、耐酸碱性和耐毒性均得到提高。消除剂SDS对3#菌株质粒能够部分消除,消除质粒后的菌株对抗生素的抗性及有机物降解能力都明显下降,表明质粒与菌株生长特性的变化有一定的相关性,可能携带与有机物降解相关的基因。通过正交实验,得到1#、2#和3#菌混合的最佳配比为1:3:3(干重),构建了混合菌。混合菌降解硝基苯的最佳条件为:30℃,pH7.0,150 r/min,接种量10 mg/L;与3株单菌相比,混合菌能够在较为苛刻的环境条件下降解硝基苯,具有较宽的底物范围;同时结合实际硝基苯工业废水特点,考察了在高盐度以及苯酚、苯胺与硝基苯共存时混合菌对硝基苯的降解。结果表明:混合菌具备较强的耐盐能力,可在3%的高盐条件下有效降解硝基苯;当苯酚(100 mg/L)或苯胺(50 mg/L)和硝基苯(200 mg/L)共存时,混合菌对硝基苯的降解不受影响。固定化混合菌降解硝基苯的最佳条件为:接种量8 mg/L,温度30℃,pH7.0,摇床转速130 r/min,其对硝基苯的降解速率和耐受能力均得到提高。固定化混合菌对硝基苯(<304.30 mg/L)的降解遵循零级动力学。此外,固定化混合菌对硝基苯的降解与Andrews非竞争性底物抑制模型拟合良好,动力学参数分别为qmax=11.84/h,Ks=254.64mg/L,Ki=129.15 mg/L。摇瓶模拟的半连续实验结果表明,固定化混合菌对硝基苯(200mg/L和400 mg/L)能够稳定处理长达100天和57天。固定化混合菌具有较强的抗冲击负荷能力,能够在高盐条件下(NaCl,5%,m/v)有效降解硝基苯。苯酚、苯胺的存在,抑制了混合菌对硝基苯的降解,抑制顺序:苯酚+苯胺>苯胺>苯酚。生物强化实验表明,游离态强化系统和固定化强化系统均可以将系统启动时间缩短10天。投加量为9.32%的游离菌强化系统处理效果稳定,连续运行34天降解率维持在85%以上,游离菌强化系统抗冲击负荷能力更强。
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