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第一部分:硝酸盐对大鼠背部随意皮瓣的作用及其机制研究目的:观察口服硝酸盐对大鼠背部随意皮瓣成活的影响并初步探讨其可能机制。方法:采用改良的McFarlane大鼠背部随意皮瓣建立皮瓣缺血性损伤模型,将24只大鼠随机分为三个组:Control组,NaCl组和Nitrate组。Nitrate组在术前7天及术后每日口服0.5mmol/L的硝酸钠,NaCl组每天口服等量的氯化钠,Control组大鼠每天口服蒸馏水。术后每天观察皮瓣的存活面积,并测量皮瓣的血液灌注量;术后第7天,检测大鼠血清硝酸盐及亚硝酸盐的含量、血清中TNF-α及IL-6的水平,观察皮瓣组织学变化并测量新生血管密度。结果:术后第3、7天Nitrate组皮瓣的存活率及皮瓣血液灌注量显著高于Control组及NaCl组(P<0.05);Nitrate组血清中硝酸盐及亚硝酸盐含量较Control组及NaCl组显著增高(P<0.05);HE染色结果显示:与Control组及NaCl组相比,Nitrate组皮瓣组织结构完整,炎性渗出物减少;免疫组织化学结果显示:Nitrate组平均微血管密度较Control组及NaCl组显著增加(P<0.05);Nitrate组血清中炎症因子TNF-α及IL-6的表达水平显著低于Control组和NaCl组(P<0.05)。结论:口服硝酸盐通过恢复缺血组织的血流量,促进毛细血管再生以及减少炎症因子的释放进而提高大鼠随意皮瓣的成活率。第二部分:硝酸盐对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的作用及其机制研究目的:观察口服硝酸盐对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的作用,从氧化应激和炎症反应角度探讨其机制。方法:建立大鼠皮瓣缺血再灌注损伤模型,设计以腰髂动静脉为蒂的3.0×4.0cm轴型皮瓣,应用血管夹阻断皮瓣动脉血流,10小时后恢复血液灌注。将32只大鼠随机分为四个组:Sham组,皮瓣切取后不做缺血再灌注处理,每天饮用蒸馏水;IR组,皮瓣进行缺血再灌注处理,每天饮用蒸馏水;IR+NaCl组,皮瓣进行缺血再灌注处理,并于术前7天及术后口服0.5mmol/L的氯化钠;IR+Nitrate组,皮瓣进行缺血再灌注处理,并于术前7天及术后口服0.5mmol/L的硝酸钠。再灌注12小时后,观察各组皮瓣外观并检测皮瓣组织含水量;检测各组大鼠皮瓣组织中MDA含量及SOD活性,检测炎症因子TNF-α及IL-6的水平;应用HE染色观察皮瓣组织结构变化,TUNEL染色检测皮瓣组织中细胞凋亡指数,免疫组织化学法观察皮瓣组织炎性细胞浸润。结果:皮瓣经历缺血再灌注损伤后大部分或全部坏死,经硝酸盐处理后皮瓣坏死情况明显改善;HE染色结果示:与IR组和IR+NaCl组相比,IR+Nitrate组皮瓣组织各层结构清楚,细胞变性、坏死现象少见;TUNEL染色及免疫组织化学染色显示:IR组及IR+NaCl组皮瓣细胞凋亡比率及炎性细胞浸润情况明显高于Sham组(P<0.05),IR+Nitrate组皮瓣细胞凋亡比率及炎性细胞浸润情况明显减轻(P<0.05);IR+Nitrate组皮瓣组织中TNF-α、IL-6及MDA含量显著低于IR组及IR+NaCl组(P<0.05),而SOD活性显著高于IR组及IR+NaCl组(P<0.05)。结论:口服硝酸盐能够有效降低皮瓣的氧化应激损伤,抑制炎症因子的释放从而减轻皮瓣缺血再灌注损伤。