乐昌含笑遗传变异的评价及繁育技术的研究

来源 :中国林业科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jack607
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乐昌含笑(M. chapensis Dandy),隶属于木兰科含笑属,是优良的速生用材树种,特别是近几年在园林绿化中得到了广泛的应用。为发掘乐昌含笑的遗传变异,并为种质资源的开发利用提供技术支持,本研究运用RAPD分子标记技术,研究了乐昌含笑的遗传多样性;探讨了含笑属的开花生物学特性,以乐昌含笑为母本进行了含笑属内种间杂交技术研究;并对乐昌含笑的组织培养技术进行了摸索。取得的主要研究结果如下:用改良的CTAB法提取了较高质量的乐昌含笑DNA,借鉴在工业设计中得到广泛应用的Taguchi的信噪比法,通过对控制因素水平及其配合的优选,利用Scion Image?图像处理与分析工具对所获得的图像进行半定量化的分析,建立了乐昌含笑良好的RAPD反应体系, 分析了组成RAPD反应体系的5个因素对扩增效果的影响。采用19个引物对6个乐昌含笑群体共144个个体进行了RAPD扩增和分析,扩增出111个位点,多态位点91条,多态比率为81.98%, Shannon信息指数为0.4751,总基因多样度为0.3187,基因分化系数0.2226。群体内的遗传变异大于群体间的遗传变异因此对种质资源的收集利用应更加重视群体内变异的发掘。按照遗传距离将乐昌含笑6个群体划分为两类:第一类主要包括广西三江、湖南宜章、湖南双牌和湖南资兴的群体,第二类包括江西官山和湖南醴陵的群体。第二类种群的遗传多样性指数高于第一类种群的遗传多样性指数, 导致乐昌含笑种群变小的主要原因是人们对自然资源地掠夺性采种。观测了含笑属的开花物候学特性, 将含笑属单花开花进程分为松蕾期、初开期、半开期、全开期、败花期等几个时期,确立了花粉采集和授粉的合理时间。以乐昌含笑为母本,云山白兰,紫花含笑,云南含笑为父本进行种间杂交,得到了一批种子,对杂交后代进行了分子遗传学分析,证实得到了一定数量的杂种后代。在乐昌含笑组织培养过程中,实现了愈伤组织和不定芽的诱导, 选取了1/2MS+2,4-D(1.5)+BA(2.0)+NAA(0.2)作为愈伤组织诱导的诱导培养基,1/2MS+2,4-D(0.3)+BA(2.0)+NAA(0.2)作为不定芽诱导的分化培养基,继代增殖培养基为1/2MS+BA(2.0)+NAA(0.2),增殖倍数=1.87,在培养基1/2MS+NAA(0.5)<WP=5>上观察到根原基开始分化。
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