利用花生核心种质发掘重要抗病资源及鉴定

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花生(Arachis hypogaea L.)是我国重要的油料和经济作物之一,其总产量、消费量和出口量均居世界首位。青枯病和黄曲霉毒素污染是限制我国花生生产和产业发展的重要障碍,花生育种和生产中迫切需要抗黄曲霉毒素污染和青枯病种质。核心种质能以最小样本数最大限度地代表一个物种或基础收集品的遗传变异,简化了种质资源的评价并可提高种质资源研究和利用效率。但是国内外尚未开展过利用核心种质发掘花生抗黄曲霉和抗青枯病种质的系统研究。本研究以中国花生核心种质和ICRISAT花生微核心种质为材料,首次进行了黄曲霉和青枯病抗性的系统鉴定,发掘出一批重要的抗病种质,并对这些抗病资源从植物学形态性状和DNA分子标记方面进行了遗传多样性分析。主要研究结果如下:1、以中国花生核心种质561份和ICRISAT花生微核心种质155份为材料,首次研究证明,利用核心种质发掘抗黄曲霉和青枯病资源是有效的。发掘出抗黄曲霉侵染种质15份,包括中国花生资源4份,ICRISAT花生资源11份;抗黄曲霉产毒种质8份,包括中国花生资源和ICRISAT花生资源各4份,其中,普通型的龙溪晚和珍珠豆型的ICG6375和ICG2019等3份种质不仅抗黄曲霉菌产毒,而且对黄曲霉菌侵染也具有一定的抗性;抗青枯病种质16份,其中中国花生资源11份,ICRISAT花生资源5份。ICRISAT花生微核心种质中抗黄曲霉侵染和产毒种质的频率显著高于中国花生核心种质。普通型花生资源中抗黄曲霉侵染种质的频率较高,多粒型资源中抗黄曲霉产毒种质的频率较高,龙生型资源中抗青枯病种质的频率较高。2、从形态性状方面分析了花生抗病种质的遗传分化。研究结果表明,中国花生资源与ICRISAT花生资源之间的重复较少,基本上以来源于中国花生资源的抗病种质聚为一组,来源于ICRISAT花生资源的抗病种质聚为另一组。抗黄曲霉侵染和产毒种质的荚果和种子较小,抗青枯病种质的出仁率相对较高。发掘出具有优良农艺性状的抗青枯病种质嵊县小红毛以及抗黄曲霉菌产毒种质51002-6和ICG2019。3、通过SSR分子标记技术分析了花生抗病种质的遗传分化。分析结果表明,来源于中国花生资源的抗病种质和来源于ICRISAT花生资源的抗病种质分别聚在一起,SSR分析结果与植物学分类更为吻合。珍珠豆型的抗黄曲霉产毒种质ICG6375与龙生型的抗青枯病种质富川大花生之间的遗传距离最大,为0.63。鉴定出与生产上推广应用的优良品种中花5号、中花6号和中花12遗传距离较远的抗黄曲霉侵染种质ICGV87281和ICG4749,扩大了我国花生品种改良的遗传基础。4、首次根据抗病基因产物的NBS类型保守域设计的简并引物对抗黄曲霉种质的DNA进行PCR扩增、克隆、测序和分析,获得1条可能与黄曲霉抗性相关的RGA片段。通过cDNA-AFLP技术,首次获得了可能与青枯病抗性相关的7条cDNA片段。
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