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目的凝血因子XIII(FxIII),又称纤维蛋白稳定因子(fibrin stabilizing factor,FSF),是转谷氨酰胺酶家族成员之一.在血液凝固的最后阶段,在钙离子存在下凝血酶裂解FXIIIArg37-Gly38肽键使FXIII活化.活化的FXIIIa催化相邻纤维蛋白分子之间的谷氨酰胺和赖氨酸形成ε-(Y谷氨酰胺)-赖氨酸共价键.FXIII通过促进纤维蛋白分子之间形成共价键并交联其它蛋白质底物而增强凝血块稳定性,使纤维蛋白凝块的机械强度和弹性增加,抗纤溶能力增强.方法1.遗传性凝血因子XIII缺乏症家系的FXIIIA5端(AAAG)nSTR分析尿素溶解实验检测一个遗传性FXIII缺乏症家系成员FXIII功能;PCR扩增外周血基因组DNA FXIIIA链5-端非翻译区短串联重复序列HUMFl3A0l(AAAG)n;变性PAGE电泳及银染法显色分析家系成员STR基因型.2.遗传性凝血因子XIII缺乏症FXIIIA亚基mRNA转录,蛋白质的表达水平分析提取一个遗传性FXIII缺乏症家系成员与正常人血液标本RNA,设计三对引物,扩增FXIII因子A链mRNA的氨基酸编码序列,半定量RT-PCR分析mRNA转录水平.3.海南地区人群中FXIII ASTR多态性的调查研究用聚合酶链反应-变性PAGE电泳及银染方法分析海南地区147名汉族人、145名黎族人FXIIIASTR多态性.结论1.一个遗传性凝血因子XIII缺乏症家系的FXIIIA5端(AAAG)nSTR分析FXIII缺乏症家系中,先证者父亲携带的内含子1第12位核苷酸C→A突变基因与其FXIIIASTR等位基因L2连锁;先证者母亲携带的外显子5第603-606位AAGA缺失和Intl(+12)C→A突变双重突变基因与其FXIIIASTR等位基因L2连锁.先证者及其弟FXIIIA一对等位基因(L2L2)上同时携带父源缺陷基因(L2)和母源缺陷基因(L2)是该病的分子基础.2.一个遗传性凝血因子XIII缺乏症家系FXIIIA亚单位mRNA转录水平分析FXIII缺乏症家系中,外显子5第600-603位碱基缺失突变,导致合成没有活性的截短FXIII A链.而内含子l第12位核苷酸C→A突变,可能影响mRNA的剪接或稳定性,导致该基因的mRNA5端的片段缺失.同时携带外显子5第600-603位碱基缺失突变和内含子1第12位核苷酸C→A突变基因导致携带者体内活性FXIIIa不足.3.海南地区人群中FXIIIASTR多态性的研究海南黎族人群FXIIIASTR多态性丰富,与海南汉族人群相比,等位基因频率分布没有显著性差异.