泰山螭霖鱼(Varicorhinus macrolepis)卵巢发育与性激素水平在年周期中变化规律的研究

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本课题对泰山螭霖鱼(Varicorhinus macrolepis)卵巢的解剖学、组织学、组织化学以及性激素水平在年周期中的变化规律进行了研究,另外对泰山螭霖鱼成熟卵子的超微结构进行了电镜观察。实验一对泰山螭霖鱼的组织学研究结果表明:泰山螭霖鱼卵母细胞在年周期的发育过程中分为6个时相。卵巢发育分期依卵巢切面中所占面积超过50%或居最高比例的卵母细胞的时相决定,分期情况如下:2~4月份,卵巢由Ⅳ期发育至第Ⅴ期,4月份进入繁殖期;4~6月份,为第Ⅴ期;6月下旬~7月份为第Ⅵ期,是排卵后退化阶段;8月份,为Ⅱ期卵巢(休整期);9月份~翌年的1月份为第Ⅲ期,以Ⅲ期卵巢过冬。根据卵巢发育的解剖学和组织学观察可知,泰山螭霖鱼为短期分批产卵类型,一年产卵一次。实验二利用组织化学的方法就糖原(高碘酸Schiff反应法,PAS)、DNA(Feulgen-Rossenbeek改良反应)、碱性磷酸酶(Gomori改良钙钴法)和酸性磷酸酶(Berry硝酸铅法)四种化学组分在不同时相卵母细胞中的变化情况进行了研究。结果如下:①PAS反应:在各个时相的卵母细胞中,卵膜均呈阳性反应。在Ⅲ、Ⅳ时相中,核周围细胞质、液泡中物质、液泡之间的颗粒呈PAS阳性反应,其它部分呈阴性。②AKP反应:在各期卵巢中的各时相卵母细胞滤泡膜呈强阳性,其它部分均为阴性。③ACP反应:不同时期卵巢中的卵母细胞间隙中的组织呈弱阳性、阳性、强阳性反应。④DNA反应:在所有时相卵母细胞中,滤泡膜上皮细胞胞核均对Feulgen-Rossenbeek改<WP=6>良法呈阳性反应,被染为紫色;在第Ⅱ时相期的卵母细胞核仁和核质中见到一些呈阳性反应的丝状物,其它部分均呈阴性反应。实验三对泰山螭霖鱼性激素(雌二醇、17α,20β-双羟孕酮)的年周期变化规律进行了研究。E2的变化规律:血清中E2自1月份开始升高,排卵前3月份达到高峰,53.6pg/ml左右,4月份排卵时降为20.22 pg/ml,一直持续到9月份,降至最低点,1.6667pg/ml左右,之后维持在低水平,直到1月份开始上升至3月份;E2自Ⅲ期开始升高,Ⅳ期后期(排卵前)升至高峰,排卵后E2骤然下降。孕酮的变化规律:孕酮在4月份(接近排卵时)达到高峰,56.333pg/ml,然后维持高水平(56.333~50.667 pg/ml)至排卵结束(6月份),11月份~翌年3月份均维持低水平(35~15pg/ml);孕酮在Ⅳ期后期升高,Ⅴ期升至高峰,高水平维持至Ⅵ期,排卵结束。泰山螭霖鱼的成熟诱导激素:17α,20β-DHP作为泰山螭霖鱼的MIH对卵母细胞的成熟起着重要的作用,17β-E2对泰山螭霖鱼卵母细胞最后成熟没有作用,不作为MIH发挥作用。实验四对泰山螭霖鱼成熟卵子的超微结构进行了研究,说明卵子的大小与鱼的个体无关,而与鱼的发育方式有关;成熟卵子内已有基本完整的细胞器结构。
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