玉米茎基腐病拮抗菌(48SJ7-1)鉴定、培养条件优化及应用的研究

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玉米茎基腐病,又称玉米茎腐病,属于世界性分布的土传病害,在世界各玉米产区均有发生,在中国危害也日趋严重。目前,防治方法主要是采用化学防治,但随着人们环保意识的不断加强,食品安全的高度重视,对化学农药造成的环境污染、农药残留、农药对人类以及其他生物的健康造成威胁等越来越重视,生物防治作为一种符合可持续发展概念的新兴技术,引起了高度的关注。本论文通过对玉米主栽品种进行了内生菌的分离,并针对玉米茎基腐病主要致病菌之一的禾谷镰孢进行了拮抗菌的筛选,获得一株具有较强抑菌效果的内生生防细菌(简称48SJ7-1),对该菌株的鉴定、培养条件优化、抑菌机制及应用进行了初步研究与分析。通过对48SJ7-1的传统鉴定、16SrDNA序列测定及系统发育分析,鉴定其为甲基营养型芽孢杆菌。对48SJ7-1培养条件进行优化,利用响应曲面法和回归方程得出细菌最佳培养条件为:温度34.64℃,pH 7.39,时间25.78 h,接菌量1.64%;利用正交试验L9(34)筛选出最佳培养基组合为:牛酵母膏6 g/L、乳糖20 g/L、硫酸镁100 mg/L。48SJ7-1的次生代谢产物对禾谷镰孢的菌丝生长和孢子萌发具有较好的抑制作用;在硫酸铵50%-60%(不含60%)饱和度时沉淀蛋白拮抗效果相对来说,明显优于其它饱和度,说明在此饱和度下沉淀出的抑菌活性蛋白最多,且也说明抑菌活性物质种类比较复杂。通过盆栽试验,接种生防菌48SJ7-1后,各处理均能降低玉米茎基腐病发病率,生防菌48SJ7-1(1×109 cfu/mL 7 mL)的防效为68.47%与对照药剂2%戊唑醇悬浮种衣剂(600g/100 kg种子)不存在显著差异;在此基础上,进行了田间两年试验,通过田间两年试验,生防菌48SJ7-1(1×109 cfu/mL 7 mL)的防效分别为74.45%和78.72%,与化学对照药剂差异不显著。盆栽和田间测定证明48SJ7-1对玉米生长均有明显的促进作用,且表观上无药害发生。
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