糖调节受损大鼠脑组织炎症因子TNF-α、IL-6的表达及其与认知功能障碍的相关研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:kjnojn
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目的本研究通过高脂高糖饲养法建立糖调节受损大鼠模型,通过水迷宫方法检测不同时间点大鼠认知功能情况,并应用免疫组织化学技术检测不同时间点大鼠脑组织炎性通路中关键因子TNF-a、IL-6的表达情况,通过t检验大鼠认知功能与大鼠脑组织中炎性因子表达的关系,以求探讨糖调节受损大鼠脑组织TNF-α、IL-6因子的表达与认知功能的关系,进一步探讨阐述糖调节受损对大鼠认知功能影响机制。方法将随机选取的体重为180-200g的健康雄性Wistar大鼠随机分为A、B两组,每组30只,A组大鼠使用的高脂高糖饲料由标准鼠饲料加蔗糖、炼猪油和蛋黄按比搭配制作:其比例为猪油18%,蔗糖20%,蛋黄3%,基础饲料59%。B组大鼠只用标准饲料喂养。两组大鼠分开喂养2周后测定大鼠血糖情况。A组大鼠试验前隔夜禁食、不禁水。试验时,将50%葡萄糖2g/kg注入胃管,采集鼠尾静脉血15μL,检测各组空腹血糖(FPG)、2h后血糖(2h PG);采用Elena建议的糖尿病判断标准:空腹血糖大于7.0mmol/L或餐后2h血糖大于11.1mmol/L诊断为DM,具备两者之一诊断为糖调节受损,入A组。B组大鼠采用上述方法取空腹血糖<6.7mmol/L且2h后血糖<11.1mmol/L入组。两组大鼠在第3W,6W,9W,12W,15W时间点分别采用Morris水迷宫实验评估大鼠认知功能,获得性训练后评估空间记忆能力,对位训练后评估工作记忆能力。分别在第3W,6W,9W,12W,15W时间点麻醉、开胸、灌洗后端头取脑,从视交叉向后连续切成厚约2mm冠状切片,用免疫组化染色方法测定’TNF-α、IL-6水平。采用SPSS21.0统计软件分析数据,以均数±标准差(X±S)表示,两组数据比较计数资料采用t检查,结果P<0.05有统计学差异。结果空间记忆能力测定:对照组无空间记忆能力缺损,测试结果正常;糖调节受损模型组,空间记忆能力测定明显降低。工作记忆能力测定:对照组无工作记忆能力缺损,测试结果正常;糖调节受损模型组,工作记忆能力测定明显降低。TNF-α的免疫组化测定:糖调节受损模型组各时点TNF-α均有较多表达;与对照组比较,糖调节受损模型组各时点表达均高于对照组(P<0.05)。IL-6因子免疫组化测定:糖调节受损模型组各时点IL-6均有较多表达;与对照组比较,糖调节受损模型组各时点表达均高于对照组(P<0.05)。结论1、糖调节受损大鼠组织炎性因子表达水平高于正常对照组,且糖调节受损发生时间与炎症因子表达成正相关。2、认知障碍与炎性因子有明显相关性,进一步阐述认知障碍发病与炎性有关。3、前瞻性观察认知功能,更多关注糖调节受损患者,更早治疗,可减低认知功能障碍的发生,提高患者生活质量。
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