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目的：构建Rabex-5RNAi慢病毒表达载体，感染人乳腺癌细胞株MCF-7，观察其对Rabex-5基因的沉默效应。明确干扰Rabex-5表达后对MCF-7细胞生物学行为的影响。初步探讨慢病毒介导RNAi沉默Rabex-5基因在乳腺癌基因治疗中的应用前景，以开辟乳腺癌治疗的新途径。方法：将设计合成的单链引物退火成双链oligo序列，连接入经AgeI和EcoRI双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中，经转化DH5α感受态细胞并筛选出阳性克隆，测序鉴定。用293FT细胞包装产生慢病毒，感染MCF-7细胞,Real-timePCR和Westernblotting鉴定抑制Rabex-5表达的效果。利用CCK-8法和Transwell小室法检测shRNA对MCF-7细胞增殖和侵袭迁移能力的影响。结果：PCR与测序鉴定证实成功构建了Rabex-5RNAi的慢病毒载体，转染MCF-7细胞后,与未干扰组和阴性对照组相比，Rabex-5的mRNA和蛋白表达下调,以RNAi3的沉默效应最佳。下调MCF-7细胞内Rabex-5表达可抑制乳腺癌MCF-7细胞的侵袭迁移能力(P＜0.05)，对细胞的增殖无显著影响(P＞0.05)。结论：成功构建了RNAi慢病毒表达载体，其可使MCF-7细胞株Rabex-5表达下调； Rabex-5基因可显著地影响乳腺癌MCF-7细胞的侵袭迁移能力，本研究为利用Rabex-5所介导的信号通路进行乳腺癌基因治疗提供了实验依据。