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本研究在兔视网膜倍频532nm激光损伤模型建立的基础上,进行太子参皂苷提取物中药干预,探讨其对于视网膜激光损伤是否具有防护作用及其机制。主要分两部分进行: 第一部分视网膜激光损伤模型的建立 目的:通过倍频532nm激光照射青紫蓝兔眼底,观察不同时期视网膜光斑区域组织形态学改变。 方法:20只健康青紫蓝兔随机分为A组16只(激光损伤组)和B组4只(正常对照组),使用倍频532nm激光照射A组兔视网膜(光斑大小200um,脉宽0.05s,光斑TsoⅢ),B组未行光凝。按激光光凝术后不同时相点:1天(d),1周(w),2周(w),1月(m)观察眼底照片的改变、光镜下组织形态学改变、电镜下超微结构的改变及光斑直径在不同时相点的变化。 结果:①眼底照相:随时间推移,光斑由1d时的浓白色水肿外观变为1m时的黑色素附着区域;②光镜观察:光凝后光斑区域主要损伤集中在视网膜外层,光感受器细胞坏死、凋亡,随时间推移,胶质细胞,色素细胞充填损伤区域,形成纤维增殖;③电镜观察:光凝后出现明显的视细胞外节膜盘结构模糊,排列紊乱,线粒体嵴模糊、断裂甚至消失,明显的空泡样变,1w开始即出现细胞染色质集边等凋亡改变,后期胶原纤维增殖;④光斑大小:光斑大小从1d时的最大值随时间推移,逐渐变小,1w时光斑大小缩小15%,2w时光斑大小缩小20%,1m时光斑大小缩小21%。 结论:倍频532nm激光照射青紫蓝兔黄斑区,光斑反应1d时最为明显,至2w左右基本稳定。 第二部分太子参皂苷提取物对视网膜激光损伤保护作用的研究 目的:在视网膜激光损伤基础上,使用太子参皂苷提取物进行灌胃干预,通过模型对照,分析其对于激光损伤视网膜的保护作用。 方法:58只青紫蓝兔随机分为三组:A组(太子参皂苷提取物灌胃组),B组(等量生理盐水灌胃组),C组(空白对照组),按视网膜光凝术后不同时相点分为1d,1w,2w,1m四个亚组,在不同时相点分别进行眼底照相比较,光镜和电镜观察、SOD(superoxidedismutase,超氧化物歧化酶)、MDA(malondialdehyde,丙二醛)、TUNEL测定及c-fos、bax基因的表达水平的比较。 结果:A组光斑大小普遍小于B组;1d时A组SOD含量明显高于B,C两组(P=0.001),各时相点B组SOD含量均要显著低于A,C两组(P<0.001);并且A组的MDA含量要显著低于B、C组(P<0.001);各个时相点,A组细胞凋亡率均要显著低于B组;不同时相点三组比较,c-fos基因表达均有显著性差异,且B组要显著高于A组及C组;bax基因表达亦有显著性差异,且A组要显著低于B组及C组。 结论:太子参皂苷提取物可抑制氧化应激反应,下调c-fos,bax基因表达水平,减小光凝损伤。