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壳聚糖无毒副作用,具有良好的生物相容性、生物可降解性,是良好的药物缓释剂和保水剂,近年来已受到众多领域的关注。但是壳聚糖分子量较大,不溶于水,使壳聚糖的应用受到了极大地限制。分子量对壳聚糖的影响很大,不同分子量的壳聚糖性质差异很大。低聚壳聚糖不仅保持了高聚壳聚糖所具有的某些功能和性质,而且还具备了高聚壳聚糖所不具备的生理活性和功能,如保湿性、抗肿瘤活性、增强免疫力等等。因此,如何有效的通过一系列物理和化学方法制备低分子量的壳聚糖,日益受到人们的关注。目前低分子量壳聚糖的制备方法主要包括化学法、酶解法和物理法。本文分别采用双氧水氧化降解法、纤维素酶解法和木瓜蛋白酶解法来制备低分子量壳聚糖,得出了这三种方法降解壳聚糖的最佳工艺条件,并对其降解产物进行了评价。(1)研究了双氧水氧化降解壳聚糖的过程与机理,考察了温度、双氧水用量、时间、反应介质、脱乙酰度等因素对降解反应的影响,以得出制备最佳产率低分子量壳聚糖的最佳工艺条件。实验中采用凝胶渗透色谱法测定产物的分子量,以红外光谱分析、x-射线衍射分析、热失重等手段表征。实验得到的最佳降解条件为:以2%的醋酸为介质,反应温度80℃,反应时间6 h、双氧水浓度为5%,双氧水用量比(H202/糖单元=2)。通过分子量和水溶性测试可知双氧水有效的降解壳聚糖,得到水溶性低分子壳聚糖。(2)纤维素酶对壳聚糖具有明显的降解作用。本文研究了酶水解温度、pH值、酶的用量和反应时间等因素对纤维素酶降解壳聚糖的影响,研究认为,在弱酸性体系中,随着反应温度的升高,反应时间的延长和纤维素酶用量的增加,降解产物的相对分子量明显降低。四种因素对纤维素酶降解壳聚糖的影响程度为:反应体系的pH值>反应温度>反应时间>纤维素酶的用量。实验结果表明,纤维素酶降解壳聚糖的优化条件为:反应温度为50℃,pH值4.5,酶加入量在6IU/(g底物),壳聚糖溶液浓度为1%,反应时间8 h。(3)研究了木瓜蛋白酶对壳聚糖的降解作用。用分光光度法测定还原糖浓度和对分子量的测定溶液粘度作为判断依据,探讨了各种因素对木瓜蛋白酶催化壳聚糖降解的影响。结果显示,木瓜蛋白酶降解壳聚糖的最优条件为:反应温度为45℃,pH值4.2,木瓜蛋白酶用量为(木瓜蛋白酶:底物比=1:5),壳聚糖溶液浓度为0.5%,反应时间20 h。