果实特异性表达载体构建与功能鉴定

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番茄基因2A11在果实中特异性表达,其mRNA表达量从非成熟绿色阶段至成熟红色阶段占总mRNA量的0.01﹪-1﹪,其中转录启始点上游1.8kb内处调控序列研究的比较清楚,至少包括三个遍在性(general)增强子元件,三个负向调控元件和四个果实特异性增强子元件.我们利用PCR方法首先克隆到1.8kb的2A11启动子,然后从中又把四个果实特异性增强子元件克隆出,分别命名为F1,F2,F3和F4.利用它们的不同组合我们构建了五个表达载体(pFS1,pFS2,pFS3,pFS4和pFS5).转基因烟草植株的组织化学与GUS活性测量知:这五个表达载体均在烟草的果实(子房)中表达,而在其它组织中未检测到.这有别于先前把全长2A11-GUS载体转入烟草,在烟草叶片组织、花组织包括子房(果实)中均未检测到GUS活性的结论.最后我们对所构建的五个表达载体在转基因烟草果实(子房)的不同发育阶段的表达活性及增强子在基因表达过程中所具有的新功能进行了分析.
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