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体细胞核移植(SCNT)是一种哺乳动物生物医学研究方面的有价值的工具。但是SCNT效率一直很低，困扰着克隆猪的应用。目前认为克隆效率低的主要原因是异常的表观遗传修饰导致的。利用组蛋白去乙酰化抑制剂(HDACi)，可以修正异常的表观遗传重编程，进而提高猪SCNT胚胎的体外发育能力。MGCD0103、PCI-24781、M344、Quisinostat和CI994是HDACi，他们都具有促进组蛋白乙酰化水平的能力，但是尚未在猪SCNT研究中报道。本研究是第一次使用这五种HDACi探究其对猪核移植胚胎发育的影响。 方法:利用不同浓度的HDACi(MGCD0103、PCI-24781、M344、Quisinostat和CI994)处理猪克隆胚胎24小时，找出最佳处理浓度，随后用最佳处理浓度处理不同时间，找出最佳的HDACi处理时间。确定好五种HDACi的最佳处理条件后，通过免疫荧光染色方法和PCR等方法确定猪SCNT胚胎中组蛋白乙酰化水平、DNA甲基化水平、凋亡水平以及多能性和凋亡相关基因表达水平。每种HDACi处理后的克隆胚胎将被移入待遇母猪体内，观察胎儿发育情况。 结果:(1)与对照组相比，0.2μM的MGCD0103处理猪克隆胚胎24 h可以显著提高猪SCNT胚胎的囊胚形成率(25.5％ vs.10.7％;P＜0.05)。之后用MGCD0103处理6小时的猪SCNT胚胎使用H3K9和H4K12抗体进行免疫荧光染色。结果显示，MGCD0103处理的假原核期猪核移植胚胎中组蛋白H3K9的乙酰化水平(AcH3K9)和组蛋白H4K12的乙酰化水平(AcH4K12)均显著地高于对对照组。体内移植实验结果表明CI994处理的猪SCNT胚胎移入2头代孕母猪后，获得3个克隆胎儿。这些结果说明MGCD0103可以增强核重编程并提高猪SCNT胚胎的体外发育能力。(2)与对照组相比，0.5 nM的PCI-24781处理猪克隆胚胎6小时可以显著提高猪SCNT胚胎的体外囊胚形成率(25.3％ vs.10.5％;P＜0.05)。之后用PCI-24781处理6小时的猪SCNT胚胎使用H3K9和H4K12抗体进行免疫荧光染色。结果显示，PCI-24781处理的假原核期猪核移植胚胎中AcH3K9和AcH4K12均显著地高于对对照组。而且TUNEL结果表明PCI-24781处理可以显著抑制SCNT胚胎的凋亡的细胞数。体内移植实验结果表明PCI-24781处理的猪SCNT胚胎移入3头代孕母猪后，获得2个猪胎儿。综上所诉，PCI-24781处理可以明显提高体细胞核重编程的能力和猪SCNT胚胎的发育能力。(3)与未处理对照组相比，5μM的M344处理猪克隆胚胎6小时可以显著提高猪SCNT胚胎的体外囊胚形成率(25.1％ vs.10.9％;P＜0.05)。而且M344处理可以显著提高假原核期猪克隆胚胎中AcH4K12平均荧光强度。但是多能性相关基因Oct4，NANOG和SOX2的mRNA表达水平在M344处理组和未处理组之间没有显著性差异。体内移植实验结果表明CI994处理的猪SCNT胚胎移入3头代孕母猪后，获得3个克隆胎儿。综上所诉，M344处理可以提升组蛋白乙酰化水平、促进核重编程的能力并且提高猪SCNT胚胎的体外发育能力。(4)与未处理对照组相比，10nM的Quisinostat处理猪克隆胚胎24小时可以显著提高猪SCNT胚胎的体外囊胚形成率(19.0％ vs.10.2％;P＜0.05)。而且Quisinostat处理可以显著提高假原核期猪克隆胚胎中AcH3K9平均荧光强度。同样，免疫荧光结果证实Quisinostat处理可以明显促进猪核移植囊胚中POU5F1的表达水平。PCR结果证明Quisinostat处理明显提升了BCL2的mRNA表达水平，但是BAX的mRNA表达水平没有显著性差异。体内移植实验结果表明Quisinostat处理的猪SCNT胚胎移入3头代孕母猪后，获得6个猪克隆胎儿。综上所诉，Quisinostat处理可以调整表观遗传修饰、促进核重编程，进而提高猪SCNT胚胎的发育能力和囊胚质量。(5)与对照组相比，10μM的CI994处理猪克隆胚胎24小时可以显著提高猪SCNT胚胎的囊胚形成率(21.9％vs.11.4％; P＜0.05)。虽然CI994处理可以显著提高假原核期猪核移植胚胎中AcH3K9和AcH4K12的平均荧光强度，但是在囊胚期中AcH3K9和AcH4K12的平均荧光强度没有显著性差异。免疫荧光结果证明CI994可以显著促进SCNT囊胚中POU5F1的表达，但不影响5mC的平均荧光强度。TUNEL结果表明CI994处理可以显著抑制SCNT胚胎的凋亡的细胞数。PCR结果表明多能性相关基因POU5F1和SOX2的mRNA表达水平在CI994处理组中显著高于未处理组。体内移植实验结果表明CI994处理(10μM for24 h)的猪SCNT胚胎移入3头代孕母猪后，获得3个猪胎儿。综上所诉，CI994处理可以提升组蛋白乙酰化水平、增强体细胞核重编程的能力，进而提高猪SCNT胚胎的体外发育能力。 结论:组蛋白去乙酰化抑制剂MGCD0103（0.2μM，24小时）、PCI-24781（0.5nM，6小时）、M344（5μM，6小时）Quisinostat（10nM，24小时）及CI994（10μM，24小时）处理猪核移植克隆胚胎可以显著增强组蛋白乙酰化水平、抑制细胞的凋亡、促进多能性相关基因的表达、提高体细胞核重编程能力和体外发育能力。