协同刺激分子在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用及药物干预的影响

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目的:通过建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomye- litis,EAE)模型并进行药物干预研究,初步探讨协同刺激分子CD80(B7-1)和CD86(B7-2)在EAE免疫炎症机制中的作用及药物干预的影响。方法:将45只雌性C57BL/6小鼠以少突胶质糖蛋白MOG35-55诱发制备EAE模型并随机分为EAE模型组(n=15),MP治疗组(n=15)和IFN治疗组(n=15),另取5只正常小鼠作为空白对照组。于发病初期,EAE模型组每天腹腔注射生理盐水0.5ml,MP治疗组每天腹腔注射甲强龙(MP)40mg/kg,IFN治疗组每天皮下注射干扰素β1a(利比,IFN-β1a)6.6ug/kg,连续3天。观察EAE症状并评分(Benson评分),HE染色及免疫组化法观察中枢神经系统(CNS)炎症细胞侵润及白质脱髓鞘。Western Blot法检测CD80,CD86及TNF-α在小鼠脑基底节区的表达情况。结果:C57BL/6小鼠于MOG35-55免疫后两周左右逐步发病,出现尾部张力下降,肢体麻痹,步态蹒跚及翻身困难等神经缺损症状。病理显示CNS大量炎性细胞浸润及白质脱髓鞘。脑组织Western Blot结果显示:①C D80在EAE模型中表达明显增加(P<0.05);MP治疗组较EAE组CD80表达水平下降(P<0.05),但未降至正常水平;IFN治疗对CD80影响较小。②CD86在EAE模型中表达明显增加(P<0.05);MP及利比治疗后CD86表达较EAE模型组显著升高(P<0.05),两种药物治疗对CD86的表达无明显差别。③T NF-α在EAE模型中表达显著上调(P<0.05),MP治疗后TNF-α水平较EAE组明显下降(P<0.05),IFN-β1a对TNF-α的表达无明显影响。④T NF-α与CD80的表达呈正相关,与CD86无相关关系。结论:协同刺激分子CD80在EAE的发病与病情进展中发挥主导作用,对TNF-α的表达有着直接或间接的促进作用,并由此参与EAE的炎性反应激活机制引起病理损伤;CD86则促进病情的缓解与神经功能恢复。因此,CD80和CD86可作为药物治疗多发性硬化(MS)的新靶点。
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