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RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是指双链RNA(ds RNA)能够高效、特异性地促进同源m RNA降解,从而阻断目标基因表达的现象。这种RNAi机制在生物细胞内普遍存在,并且由于其能够方便、快捷地阻断目标基因的表达,近些年已经成为基因治疗的有效手段之一。其中,利用RNAi技术阻断肿瘤细胞发育过程中的特定信号通路,可高效、便捷地促进肿瘤细胞凋亡,是目前抗肿瘤治疗的热点课题之一。目前,RNAi技术临床应用过程中面临着的瓶颈主要是si RNA的有效递送问题。优秀的si RNA的递送载体应具备以下几个要素:(1)易与si RNA结合,并能保护si RNA不被核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)降解,同时载体与si RNA复合物又不能影响si RNA进入细胞后发挥作用;(2)载体材料转染效率高;(3)对特异组织或特异细胞具有靶向性,可以提高特异组织或细胞的转染率,从而提高特异组织或细胞的RNAi效率;(4)材料毒性低,不易引起机体的免疫反应,生物相容性好,容易在生物体内降解。通过对目前已知的si RNA递送载体比较后我们发现,阳离子多肽载体是目前较为理想的载体材料之一。其具有容易合成,尺寸可调控,结构容易修饰,可修饰靶向配体使其具有靶向定位功能,并且材料性质稳定,细胞毒性低,在生物体内容易被代谢等优点[1]。基于此,本课题考察了苯丙氨酸二肽纳米球(CDPNTs)作为一种新型si RNA载体的应用潜力。我们以卵巢癌细胞(SK-OV-3)为细胞模型,考察了CDPNTs递送survivin基因的si RNA的能力,以及促SK-OV-3细胞的凋亡情况。在本论文中,我们主要考察了CDPNTs载体材料的细胞毒性,与si RNA结合情况,转染情况,对survivin基因m RNA干扰效果,以及对SK-OV-3细胞的促凋亡作用。检测结果表明CDPNTs材料细胞毒性较低,CDPNTs浓度分别为10和100μg/m L时,SK-OV-3细胞48小时存活率分别为88.241±1.739%和83.102±5.428%。而阳性对照组Lipofectamine 2000(5μg/m L)的细胞存活率为80.440±5.842%,由此可见浓度为10-100μg/m L的CDPNTs细胞毒性均低于Lipofectamine 2000;我们通过琼脂糖电泳实验证明,CDPNTs可以与si RNA稳定结合;CDPNTs递送FAM标记的si RNA进入细胞后,荧光显微镜观察到FAM-si RNA集中在细胞质基质中;CDPNTs递送si RNA进入细胞后可以正常发挥RNAi作用,我们用CDPNTs递送了抑制凋亡的survivin基因的si RNA进入SK-OV-3细胞48小时后,细胞中survivin基因m RNA的表达被显著抑制,并且细胞出现明显凋亡。