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我国海域辽阔，是水产品养殖和消费大国。扇贝是重要的水产品种类，以其营养价值高且味道鲜美的特点深受消费者的喜爱，具有广阔的市场空间。其中河北省的海湾扇贝养殖与加工产业大部分分布在环渤海地区，每年产量可观。但在加工过程中由于企业深加工及综合利用技术落后导致了扇贝加工副产物裙边利用率低，大部分被直接放弃，造成资源的严重浪费和环境污染。经研究发现扇贝裙边富含蛋白质，可用作蛋白类产品的原料。针对扇贝加工下脚料加工工艺简单、利用程度低等产业发展的问题，本研究以扇贝加工副产物扇贝裙边为研究对象，利用扇贝裙边制备生物活性肽，通过酶工程制备技术以及超滤、SephadexG-25、HPLC等一系列纯化技术分离具有生物活性的抗氧化肽，以期为扇贝裙边的综合深加工利用提供理论与技术支持。本研究的主要实验内容与结果如下：1.菠萝蛋白酶酶解扇贝裙边制备抗氧化肽的工艺研究。本研究以DPPH清除率即抗氧化活性为选择指标，得到了酶解制备扇贝裙边抗氧化肽的最佳工艺条件。首先进行了五个单因素试验，根据单因素的试验结果从五个单因素即温度、pH值、底物浓度、加酶量和时间中选择出温度、pH值和底物浓度三个对酶解效果有显著性影响的因素对扇贝裙边酶解工艺进行响应面优化，并且以抗氧化活性作为考察指标，得到的最佳酶解条件为反应温度68.37℃，pH9.35，底物浓度6.25%，加酶量6000U/g，反应时间6h。在此最优酶解条件下测定DPPH的清除率达到70.32%。2.扇贝裙边抗氧化肽的分离纯化研究。经过酶解得到的酶解液中通常含有多种杂质，比如未酶解的扇贝裙边、变性的蛋白酶等。因此需要对酶解产物进行分离纯化以获得目标抗氧化肽。第一步利用超滤法分离纯化扇贝抗氧化肽。采用对酶解液具有不同分离效果的10kDa、5kDa、3kDa、1kDa的四种规格的超滤膜对扇贝裙边酶解产物进行初步分离，获得SSPH-Ⅰ(<1kDa)、SSPH-Ⅱ(1kDa~3kDa)、SSPH-Ⅲ(3kDa~5kDa)、SSPH-Ⅳ(5kDa~10kDa)、SSPH-Ⅴ(>10kDa)和SSPH-Ⅵ（酶解原液）六种不同分子量组分。冷冻干燥后利用清除DPPH自由基和清除羟自由基两种方法评价比较以上六种组分的抗氧化性，得到具有最强抗氧化活性的组分是SSPH-Ⅱ(1kDa~3kDa)，当该组分浓度为32mg/ml时，其DPPH清除率达到94.16%，羟自由基清除率达到31.20%。第二步采用Sephadex G-25凝胶色谱层析方法对组分SSPH-Ⅱ进行纯化。为得到较好的分离效果本试验对凝胶层析条件进行了优化，得到在洗脱速度为1.0mL/min，上样量为0.25mL，上样浓度为50mg/mL的条件下，层析分离效果最好。在最佳的层析条件下从SSPH-Ⅱ分离纯化出两个组分即SSPH-Ⅱ-F1和SSPH-Ⅱ-F2。采用DPPH自由基清除方法测定SSPH-Ⅱ-F1和SSPH-Ⅱ-F2两个组分抗氧化性后发现SSPH-Ⅱ-F1抗氧化性高于SSPH-Ⅱ-F2，当两个组分的浓度均为32mg/mL时，SSPH-Ⅱ-F1的DPPH自由基清除率为34.10%，SSPH-Ⅱ-F2的DPPH自由基清除率为16.85%。第三步利用反相高效液相色潽法（RP-HPLC）进一步分离纯化SSPH-Ⅱ-F1。在如下色谱条件下，色谱柱Syncronis aQ （250mm×4.6mm，5μm）；柱温：30℃；流速：0.6mL/min；进样量：20μL；流动相：10%乙腈（0.05%TFA）检测波长为280nm。SSPH-Ⅱ-F1经分离纯化后得到系列峰SSPH-Ⅱ-F1-P，选取其中含量相对较高的组分峰SSPH-Ⅱ-F1-P7进行质谱分析。第四步利用在线净化液相色谱-四级杆静电场轨道阱串联质谱仪(Q Exative)测定SSPH-Ⅱ-F1-P7的分子量。得到SSPH-Ⅱ-F1-P7为7种多肽的混合物。由图谱中各离子峰可以判断出这些多肽的分子质量在1000Da~1700Da之间，与SSPH-Ⅱ(1kDa~3kDa)的分子量范围相符。