复方吡喹酮纳米乳的制备

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血吸虫病、绦虫、线虫等寄生虫病是严重影响人类身体健康的疾病,研制治疗寄生虫疾病的药物是重大的实际意义。本研究以纳米乳为载体,通过筛选并优化处方,制备了复方吡喹酮纳米乳,并对其安全性、稳定性进行了考察,为复方吡喹酮纳米乳在兽医临床上的应用提供依据。1.制备复方吡喹酮纳米乳,分别称取适量的吡喹酮和芬苯达唑,加入油相、表面活性剂和助表面活性,搅拌直至全部溶解,然后向其中缓慢滴加蒸馏水,边滴加边搅拌,直至形成澄透透明的液体即可。复方吡喹酮纳米乳的最佳配方是w(吡喹酮)=1.20﹪、w(芬苯达唑)=0.04﹪、w(乙酸乙酯)=11.98﹪、w(N、N-二甲基乙酰胺)=5.39﹪、w(乙醇)=29.17﹪、w(冰醋酸)=2.83﹪、w(吐温-80)=23.02%、w(二甲基亚砜)=19.97%和w(蒸馏水)=6.40%组成,总组分为100﹪。2.对复方吡喹酮纳米乳进行质量评价。用Malvern Zetasizer Nano ZS激光粒度测定仪测粒径及其分布。测出的平均粒径为11.2nm,粒径小于9nm<15%,大于20nm<2.5%,9~20nm约占82.5%。说明制备的纳米乳粒径较均匀,分布范围窄。纳米乳均澄清透明,液体内无絮状沉淀,未见分层,可初步确定为纳米乳。所制得的液体分别加入亚甲基蓝和苏丹红Ⅲ,亚甲基蓝(蓝色)扩散速度比苏丹红III(红色)快,说明其为水包油型。将制好的混合液放入-4℃(冰箱中)、室温25℃和60℃(电热恒温培养箱中),在0、10、30d、3个月后观察,稳定性良好。经过4000r/min、30min离心后,无分层、沉淀或絮凝出现,并且澄清透明。形态观察透射电镜下观察结果显示,复方吡喹酮纳米乳呈圆形,液滴分布均匀,表明分散性良好。3.对复方吡喹酮纳米乳进行安全性评价。通过经口急性毒性试验,对复方吡喹酮纳米乳进行安全性评价。预实验后,取70只小白鼠按体重随机分6组,每组8只,雌雄各半,编号。对小白鼠灌胃给药,给药后一周内观察其中毒症状并记录各组的死亡数,计算死亡率,将结果数据代入Bliss软件或简化寇氏法计算公式,求出LD50和95%可信限。结果显示:复方吡喹酮纳米乳的半数致死量(LD50)为649.01mg·kg-1,LD50的95%可信限为:560.09~752.04mg·kg-1,属于低毒级药物,其安全性符合临床用药的要求。
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