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目的:原代培养大鼠骨髓间质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs),看灌胃肉苁蓉煎剂后的大鼠血清是否有促进大鼠骨髓间质干细胞向神经样细胞分化的作用。
方法:1.进行大鼠骨髓间质干细胞的体外培养并鉴定2.以细胞免疫化学方法行诱导细胞NSE,nestin,GFAP三个蛋白的鉴定,以流式细胞仪检测细胞周期。
结果:①大鼠骨髓间质干细胞培养良好。②肉苁蓉可以诱导大鼠骨髓间质干细胞向神经样细胞分化,诱导后的细胞明显表达NSE,nestin,但表达GFAP极低。③β-巯基乙醇的诱导效果明显高于低、中、高剂量组(P<0.05);低、中剂量组之间比较无统计学意义(P>0.05);高、中剂量组之间比较无统计学意义(P>0.05)。④高、低剂量组之间比较有统计学意义(P<0.05)。⑤流式细胞仪检测诱导后各组细胞显示:阳性药β-巯基乙醇有一定的毒性,抑制细胞增殖,而中药肉苁蓉有促进细胞增殖的作用。
结论:大鼠骨髓间质干细胞培养良好,免疫组化显示:阳性药物组诱导分化作用强;肉苁蓉各组的诱导作用弱,但与空白对照组比较有阳性意义。流式细胞仪检测细胞周期示:阳性药物组,细胞增殖力弱,药物毒性大。肉苁蓉各组,增殖力强。总之,肉苁蓉可诱导大鼠骨髓间质干细胞向神经样细胞分化,证明了中医“肾生髓”理论的科学性。