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本项工作主要研究了CUEDC2和SOX4蛋白质在肿瘤细胞生长调控中的作用,并发现了上述蛋白质的重要新功能:(一)CUEDC2是一个包含CUE结构域,但功能尚不明确的基因。CUE结构域,约含40个氨基酸残基的保守结构,广泛存在于真核细胞的蛋白质中。它能与泛素结合,既能识别单泛素也能识别多泛素,并能够促进分子内的单泛素化。我们在发现CUEDC2能够与孕激素受体(PR)结合,促进孕激素依赖的PR泛素化降解基础上(The EMBO Journal,2007),进一步研究了CUEDC2对雌激素受体α(ERα)功能的调控。研究发现CUEDC2可以通过雌激素非依赖的方式与ERα发生相互作用,并通过泛素-蛋白酶体通路促进ERα的降解。通过比较MCF-7对照细胞和MCF-7 CUEDC2干涉细胞中ERα的蛋白量,我们发现CUEDC2的干涉与ERα蛋白质水平的上调正相关。进一步的结果显示,CUEDC2抑制了ERα介导的下游靶基因的转录,并且染色质免疫沉淀实验进一步证明CUEDC2能够减少ERα与靶基因启动子区域雌激素反应元件的结合。与这些结果一致的是,CUEDC2能够抑制雌激素诱导的乳腺癌细胞增殖。以上显示,CUEDC2促进ERα蛋白质的泛素化降解,并抑制ERα功能,在乳腺癌细胞生长中发挥了重要作用。(二)SOX4在许多发育进程中发挥了关键作用,如胚胎心脏发育、胸腺发育和神经系统发育等。越来越多的研究还表明,SOX4蛋白质在许多肿瘤细胞中过量表达,并与疾病预后相关。但是到目前为止,SOX4在肿瘤发生和发展中的作用机制还不明确。在本研究中,我们发现SOX4蛋白质表达水平被DNA损伤信号诱导上调;更为重要的是,利用RNA干涉技术干涉内源SOX4的表达能显著抑制p53抑癌蛋白质在DNA损伤反应中的激活。以上提示,SOX4参与了DNA损伤反应中p53的激活。通过进一步研究,我们发现SOX4能结合p53,并且其相互作用随DNA损伤信号的刺激而增强。更深入的研究发现,SOX4干扰了Mdm2与p53的相互作用,抑制p53泛素化降解进而使p53稳定性增加。我们还发现,SOX4能结合p300/CBP并促进其与p53的相互作用,从而促进p53乙酰化修饰。综上,我们发现SOX4在DNA损伤激活p53的过程中发挥了关键作用及其机制,为今后更深入研究SOX4在DNA损伤和肿瘤发生中的作用提供了重要线索。