水貂细菌性肺炎是困扰水貂养殖业的难题,为了调查引起该病的主要病原菌并探索安全有效的防治方法,2011年至2013年,对从山东、辽宁两省送检的水貂肺炎病例进行病原菌分离,共分离到38株细菌,结合生化鉴定和分子生物学鉴定方法,最终确定包括31株绿脓杆菌,4株肺炎克雷伯氏菌,1株臭鼻克雷伯氏菌,1株产酸克雷伯氏菌和1株与绿脓杆菌混合感染的鲍曼不动杆菌。绿脓杆菌包括三个血清型G型(22/31)、C型(6/31)、B型(3/31),G型为主要流行血清型。药敏试验结果显示所分离到的38株肺炎病原菌均对亚胺培南和美洛培南敏感,对氨苄青霉素和阿莫西林／克拉维酸耐药。所有分离到的病原菌均对小鼠有较强致病性。取绿脓杆菌G、C、B血清型各一株,做标准抗原,并免疫家兔,采集血清做标准抗体,通过方阵凝集试验确定标准抗原抗体最适反应浓度。将分离到的绿脓杆菌菌株免疫小鼠,采集血清,利用标准抗原检测免疫后小鼠血清效价,最终筛选了PA-L14(G型)、PA-L05(B型)、PA-L06(C型)三株免疫原性较好的菌株作为疫苗候选菌株。以终浓度为0.3%甲醛,经37℃、24h对菌液进行灭活处理。疫苗包含9×109CFU/mL的G型和B型绿脓杆菌,6×109CFU/mL的C型绿脓杆菌,配以20%铝胶佐剂,0.01%的硫柳汞,免疫健康无抗体的水貂进行抗体效价跟踪,结果显示免疫水貂在半月内机体可产生较高水平的抗体,该抗体水平可维持3个月,满足了在绿脓杆菌出血性肺炎流行季节对水貂的保护要求,大规模动物免疫回访结果显示,疫苗速发接种反应发生率低,预后良好,对预防接种和发病后紧急接种,均具有较好的保护性。