第一部分:α干扰素-1b调控蛋白激酶Cε、Cα抑制肝星状细胞肝纤维化及机制的体外研究目的:探讨 α 干扰素-1b（INF-α-1b）调控蛋白激酶 Cε（proteinkinase Cε,PKCε）、蛋白激酶 Cα（protein kinase Cα,PKCα）抑制肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）纤维化及机制。方法:采用不同浓度 IFNα-1b（100、200、400、800、1 000 U/mL）处理 HSC-T6细胞株,同步设置无α干扰素-1b处理的对照组;四甲基偶氮唑盐比色法分析HSC-T6细胞增殖;分析羟脯氨酸含量变化:免疫荧光染色检测PKCε和PKCα的表达,RT-PCR检测 PKCε、PKCα、β-链蛋白（β-catenin）、生存素（Survivin）mRNA 的水平。蛋白质印迹法检测 PKCε、PKCα、β-catenin、Survivin 蛋白水平。用 One Way ANOVA方式行方差分析。结果:给药24 h后,100、200、400、800、1000U/mL,α干扰素-1b组抑制率分别为（15.85±1.05）%、（36.59±1.03）%、（45.12±1.05）%、（50.00±1.01）%和（62.20±1.02）%,组间比较差异有统计学意义（F=27.478,P<0.01）;48h抑制率分别为（20.87±1.09）%、（43.96±1.08）%、（53.85± 1.08）%、（64.84±1.06）%和（74.72±1.07）%,组间比较差异有统计学意义（F=25.321,P<0.01）。48h时IC50为343.47U/mL。100、200、400 U/mL α干扰素-1b组的羟脯氨酸水平分别为（7.48±0.28）、（6.26±0.17）、（3.86±0.20）μg/mL,均低于对照组的（8.47±0.32）μg/mL,差异均有统计学意义（t值分别为4.033、10.564和21.160,均P<0.05）。100、200、400U/mL α干扰素-1b组的PKCε荧光强度均低于对照组,比较差异均有统计学意义（t值分别为1.984、2.457、7.771,均P<0.05）;PKCα的荧光强度分别也均低于对照组,比较差异均有统计学意义（t值分别为9.232、15.921、22.222,均P<0.01）。随着α干扰素-1b水平的增加,HSC-T6细胞PKCε、PKCα、β-catenin、Survivin水平较对照组明显下降,比较差异均有统计学意义（t值分别为7.020、24.562、45.701和14.241,均P<0.01）。随着 α 干扰素-1b 水平的增加,HSC-T6 细胞 PKCε、PKCα、β-catenin 和 Survivin蛋白水平较对照组明显降低,比较差异均有统计学意义（t值分别为9.564、4.409、10.036 和 6.794,均 P<0.01）。结论:α干扰素-1b能够剂量依赖性地下调肝星状细胞胶原表达,降低PKCε、PKCα、β-catenin、Survivin 表达水平,抑制 HSC-T6 增殖。第二部分:血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞蛋白激酶Cε、Cα表达的影响目的:探讨血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞蛋白激酶Cε（PKCε）、蛋白激酶Cα（PKCα）表达的影响。方法:采用不同浓度（1、2、4、6、8、10μmol/L）血管紧张素Ⅱ的处理HSC-T6细胞株,四唑盐（MTT）法检测HSC-T6细胞增殖,以不同浓度（2、4、6μmol/L）血管紧张素Ⅱ分析羟脯氨酸含量变化,免疫荧光染色检测PKCε和PKCα的表达,real time PCR分析PKCε和PKCα的mRNA的水平。结果:不同浓度（1、2、4、6、8、10μmol/L）血管紧张素Ⅱ促进HSC-T6细胞增殖（F=25.321,P<0.001）,上调羟脯氨酸水平（F=13.283,P<0.01）并呈现明显的剂量效应;伴随血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）浓度的增加,PKCε明显增加（F=21.387,P<0.01）,并发生转位于细胞膜;PKCα明显增加,尤以转位膜、胞浆比较明显（F=19.431,P<0.01）,并呈现明显的剂量效应;同时可增加PKCε和PKCα的mRNA的表达水平增加（F=13.279,15.174,P<0.05）。结论:血管紧张素Ⅱ能够剂量依赖性地上调肝星状细胞胶原表达,提高蛋白激酶Cε、Cα表达水平,促进肝星状细胞的增殖。