杀微生物剂候选物体外抗HIV-1和白色念珠菌活性的初步研究

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艾滋病又称获得性免疫缺陷综合征(Acquired Immunodeficiency Syndrome,AIDS),是由人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)所引起的致死性传染病。HIV感染人数逐年上升,预计到2010年,全国HIV感染者将突破一千万。20多年来已获FDA批准临床使用的抗HIV药物有近25种,为了从根本上治愈AIDS患者,HIV疫苗的研制势在必行,但由于HIV具有高度的复杂性和变异性,HIV疫苗尚未研制成功。本课题研究的杀微生物剂(Microbicides)能够预防HIV和多种性传播病原体(Sexually Transmitted Disease,STD)的传播。目前全世界还没有一种杀微生物剂上市,但有20余种已经进入了临床研究。本课题的研究基于寻找新型的杀微生物剂,采用了合胞体形成抑制实验法和MTT比色法对七种硫酸多糖化合物821A、821A-1、Rutin、LD、、ZTZ、N、KS和两种稀土化合物LCI、LNI进行了研究。合胞体形成抑制实验法是采用HIV-1ⅢB(X4)可以诱导C8166细胞形成合胞体,有效的样品可以抑制合胞体的形成,于是通过计数合胞体的数量便可以测定样品的抗HIV-1活性。MTT比色法用于测定样品的毒性,基本原理是活细胞内的线粒体琥珀酸脱氢酶可将黄色的MTT还原成蓝紫色的晶体甲簪(formazan),其形成量与活细胞数量成正比,通过读取OD值便可快速、准确的获得活细胞数量。研究结果表明,待测样品硫酸多糖821A-1,LD和KS相较其它待测样品显示出对C8166细胞较小的毒性,其CC50值分别为169.06 ug/ml,1000 ug/ml和184.40ug/ml。待测样品硫酸多糖821A-1,821A,KS和LD与稀土化合物LNI、LCI较其它待测样品显示出一定的抑制HIV—1(ⅢB)(X4)诱导C8166细胞形成合胞体的效果,其EC(50)值分别为0.99 ug/ml,0.49 ug/ml,4.96 ug/ml,8.19 ug/ml,2.64 ug/ml和5.57 ug/ml。治疗指数TI分别为169.75,172.84,37.18,122,64.12和24.72。其中821A,821A-1和LD表现出较强的合胞体抑制活性。通过改良的MTT法,测定了化合物821A,821A-1,LCI,LNI,Rutin和LD对白色念珠菌的抑制作用,其中LCI和LNI的MIC90分别为0.89 mg/ml和0.65 mg/ml相较其它待测化合物显示出一定的抑制活性。综上所述,待测化合物中821A,821A-1,KS,LD,LNI和LCI较其它待测样品显示了较高的抗HIV-1活性,而LCI和LNI较其它的待测样品显示出较好的抑制白色念珠菌的活性,具有良好的开发前景,为进一步进行杀微生物剂的开发研究奠定了基础。
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