甜橙精油对抑郁小鼠缓解作用的研究

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植物精油多具有独特的化学成分和芳香气味,在食品、药品、日化等多个领域有广泛的应用,迷迭香、柠檬草等精油在抗抑郁方面起到了相关的调节作用,柑橘类的柠檬精油也有报道,但甜橙精油在缓解精神抑郁方面的作用却鲜有研究。本文围绕甜橙精油对小鼠抑郁症的缓解作用开展研究,研究了甜橙精油的摄入(灌胃、嗅闻、饲喂)对慢性轻度不可预见性应激模型(CUMS)及利血平模型的拮抗作用,测定了相关行为学实验指标(旷场实验、强迫游泳实验、糖水偏好实验)、血清胆固醇、脑部单胺类神经递质(5-羟色胺、多巴胺)数据,讨论了甜橙精油不同摄入方式对小鼠精神抑郁缓解作用的影响。然后研究了甜橙精油中的主要成分D-柠檬烯对于利血平模型的拮抗作用,从抑郁症的发生机制上探讨了D-柠檬烯对小鼠抑郁样症状的缓解作用。主要研究内容和结果如下:1.甜橙精油嗅闻对CUMS模型小鼠的抑郁样症状缓解作用通过CUMS加孤养模型来诱导小鼠抑郁症,比较实验组和对照组的小鼠糖水偏好实验、强迫游泳实验和旷场实验数据来验证模型建立成功与否。然后对CUMS模型小鼠进行甜橙精油的嗅闻处理,探究甜橙精油的嗅闻对小鼠精神抑郁是否有缓解作用。结果表明CUMS处理的小鼠表现出体重增长减缓、好奇程度降低、对绝望环境挣扎减弱等抑郁样症状。精油长期嗅闻组(连续7 d)和短期嗅闻组(每天1.5 h)均能够缓解相应的抑郁样症状。并且模型组的小鼠血脂代谢出现高TC、低HDL-C、高LDL-C的症状,嗅闻甜橙精油能够轻微缓解这种对小鼠血脂代谢的负面影响。2.甜橙精油三种摄入方式对小鼠利血平模型的拮抗特性研究及比较对实验组小鼠分别进行了甜橙精油的灌胃(0.1 mL/kg、0.05 mL/kg、0.025mL/kg)、嗅闻和饲料(0.5%w/w、1%w/w、2%w/w)饲喂处理,随后通过腹腔注射利血平(1 mg/kg)构建了小鼠利血平模型,比较了甜橙精油三种摄入方式、三种剂量、饲料饲喂时间长短对利血平模型的拮抗作用;测定了饲喂四周的小鼠血清胆固醇及脑部单胺类神经递质等指标。结果表明,利血平模型小鼠表现出体温降低和眼睑下垂的特异性症状,另外还有行为受抑制、单胺类神经递质耗竭、血脂代谢异常等症状。而甜橙精油灌胃(0.05 mL/kg)、嗅闻及饲料饲喂(1%w/w、0.5%w/w)四周后,小鼠均可表现出对利血平模型的拮抗作用,抑郁样症状有所扭转。其中灌胃能够最大程度上发挥甜橙精油对小鼠精神抑郁的缓解作用。甜橙精油饲料饲喂小鼠四周后,小鼠表现出较强的利血平模型拮抗特性,血清胆固醇含量向正常值方面接近,表现出对血脂代谢的良性调节,小鼠脑部5-羟色胺和多巴胺含量明显高于利血平模型小鼠,促进了小鼠脑部单胺类神经递质的释放,对精神抑郁有缓解作用。3.D-柠檬烯灌胃及嗅闻对小鼠利血平模型的拮抗作用对小鼠进行高、中、低三个剂量的D-柠檬烯灌胃(25 mg/kg、50 mg/kg、75 mg/kg)或嗅闻处理,随后腹腔注射利血平(1 mg/kg)构建了小鼠利血平模型,分析灌胃和嗅闻处理小鼠对利血平模型的拮抗特性及行为学实验的效果,测定了各组小鼠脑部单胺类神经递质及相应促激素含量,分析了下丘脑的病变情况及下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放因子免疫组化情况。结果表明,经过D-柠檬烯的灌胃或者嗅闻,小鼠表现出对利血平模型的拮抗特性及抑郁的缓解作用:体温降低量及眼睑下垂程度均有向正常值恢复;小鼠行为活跃性有所增加;5-羟色胺、多巴胺、酪氨酸羟化酶的含量上升,促肾上腺皮质激素含量有所降低,促肾上腺皮质激素释放因子水平下调,且对于利血平模型引起的下丘脑的病变有一定的保护作用。D-柠檬烯中、低剂量(25 mg/kg、50mg/kg)灌胃表现出较强的缓解抑郁作用。4.小鼠嗅闻环境的香气分析及香气在脑部的吸收情况研究模拟小鼠的嗅闻环境,通过顶空直接进样和固相微萃取两种方式测定该环境的气空气中所含挥发性成分,研究了小鼠短暂或连续嗅闻或灌胃甜橙精油中四种特征香气物质后(D-柠檬烯、α-蒎烯、芳樟醇、β-月桂烯),其脑部香气物质含量。结果表明,嗅闻环境中主要挥发性物质为D-柠檬烯(90%以上),其次为α-蒎烯(5.98%)和β-松油烯(2.97%)而嗅闻环境中的主要成分D-柠檬烯的含量在第一天结束后急剧降低,随后4天环境内D-柠檬烯含量基本持平,保持平衡。在四种特征香气上,灌胃组所吸收作用于脑部的含量均要高于嗅闻组,D-柠檬烯在小鼠脑部含量最高,芳樟醇和α-蒎烯在小鼠脑部的含量较低。
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