牛FATP1启动子调控PPAR基因转录水平的研究

来源 :贵州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:minggangju
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脂肪酸转运蛋白1(FATP1)促进长链脂肪酸进入细胞内,并协调游离脂肪酸的摄取,从而影响脂质分布与沉积,有研究表明FATP1能够促进脂肪在相关组织中沉积,在参与脂肪代谢的同时也参与能量代谢。过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)作为一种主要存在于脂肪组织细胞中的蛋白基因,既参与脂肪沉积过程的调控,也参与脂类代谢和脂肪细胞分化等过程。本研究以贵州黄牛为实验动物,采用qRT-PCR检测PPARγ基因在关岭黄牛、思南黄牛、黎平黄牛和威宁黄牛的心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、脂肪等组织中的表达量;PCR克隆FATP1基因启动子区活性较高的3个片段,以及克隆PPARγ基因CDS区,构建p EGFP-N3-FATP1-Pn-PPARγ真核表达载体;将p EGFP-N3-FATP1-Pn-PPARγ重组载体转染小鼠3T3-L1脂肪细胞和牛原代脂肪细胞,通过观察绿色荧光的强弱,初步验证FATP1基因启动子能否驱动PPARγ基因在细胞中表达,并采用qRT-PCR检测PPARγ基因在小鼠3T3-L1和牛脂肪细胞中的表达量,进一步验证FATP1基因启动子对PPARγ基因在转录水平的调控作用。主要研究结果如下:(1)PPARγ基因在4个贵州地方黄牛不同组织中都有表达,在同一牛种资源不同组织中的表达存在差异,并且具有脂肪组织特异性;在不同的牛种质资源部分组织中PPARγ基因的表达也存在差异性。(2)FATP1-P8、FATP1-P7和FATP1-P4启动子片段对PPARγ基因在小鼠3T3-L1细胞和牛原代脂肪细胞中mRNA的表达都具有正向调控作用,并且FATP1-P4启动子片段的作用效果最显著。
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