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背景和目的:高泌乳素血症(Hyperprolactinemia,HPRL)是指由各种原因引起以外周血泌乳素(Prolactin,PRL)水平异常升高(>25ng/ml)为主要表现的一类常见内分泌疾病,常导致女性卵泡发育及排卵功能障碍,但有关其抑制卵泡发育和排卵的作用途径及机理还不十分清楚。已有研究提示,PRL可通过作用于促性腺激素释放激素(Gn RH)神经元,抑制Gn RH释放,导致FSH和LH分泌减少,从而阻止卵泡的发育及排卵。然而,现有研究显示,仅5%PRL受体表达于Gn RH神经元,95%PRL受体表达于Kiss1神经元,这提示HPRL可能通过Kiss1/GPR54系统影响卵泡发育及排卵。另外,有研究显示,外周卵巢组织的Kiss1/GPR54系统也参与了卵泡发育及排卵过程,故本研究拟通过腹腔注射盐酸甲氧氯普胺(Metoclopramide,MC)诱导HPRL模型,探讨HPRL是否可通过外周卵巢Kiss1/GPR54系统影响小鼠各级卵泡发育及排卵过程。方法:1、通过免疫组织化学方法检测PRL受体与Kiss1蛋白在小鼠卵巢卵泡的共表达。2、通过HE染色和输卵管划痕方法检测HPRL以及外源给予重组的kisspeptin(Kp)对卵泡发育和排卵的影响。3、通过放射免疫方法检测HPRL状态下,小鼠外周血中PRL、雌二醇(E2)、孕酮(P4)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的水平变化。4、通过实时定量PCR技术,检测HPRL状态下卵巢Kiss1、GPR54、Plat和Serpine1m RNA表达水平变化。5、通过免疫组织化学技术,检测HPRL状态下卵巢Kiss1、GPR54和环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达水平变化。6、通过离体卵巢组织培养进一步检测PRL对卵泡发育及Kiss1、GPR54m RNA表达水平的影响。结果:1、免疫组织化学结果显示:PRL受体与Kiss1蛋白共同表达于卵巢组织卵泡的颗粒细胞和膜细胞。2、与对照组相比,腹腔注射盐酸甲氧氯普胺注射液,可使小鼠外周血浆中PRL水平显著增加(P<0.05)。3、与对照组相比,HPRL对卵巢重量及卵巢指数没有明显影响(P>0.05),但可导致成熟卵泡数显著下降(P<0.01)。同时,伴有小鼠外周血浆中E2、P4、FSH、LH水平显著降低(P<0.05或0.01)以及卵巢组织Kiss1/GPR54 m RNA和蛋白表达水平的下降。4、与对照组相比,HPRL可明显抑制小鼠的促超排卵泡数(P<0.01)。同时,伴有卵巢组织的Plat和Kiss1/GPR54 m RNA以及COX-2蛋白表达水平的下降(P<0.05或0.01)。给予外源重组Kisspeptin因子,可使HPRL小鼠的促超排卵泡数显著性增加(P<0.01)。同时,伴有卵巢组织的Plat和Kiss1/GPR54 m RNA以及COX-2蛋白表达水平的明显上升(P<0.05或0.01)。5、离体卵巢组织培养结果显示:与对照组相比,高浓度PRL对小鼠初级卵泡、次级卵泡数无显著影响(P>0.05),但可使成熟卵泡数显著降低(P<0.01)。同时,伴有卵巢组织Kiss1/GPR54 m RNA表达水平的显著下降(P<0.05或0.01)。结论:高泌乳素血症可明显抑制小鼠卵泡的发育和促超排卵泡数,这种效应可能部分通过下调卵巢组织Kiss1/GPR54的表达实现。