左旋四氢巴马汀在大鼠全脑缺血再灌时对核因子-κB及相关基因表达的影响

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目的:通过检测大鼠全脑缺血再灌注时海马CA1区核因子-κ B(NF-κ B)、抑制蛋白(IκBα)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素(IL-1β、IL-10)的表达以及凋亡细胞数目的变化,探讨NF-κ B在全脑缺血再灌注损伤中的作用以及左旋四氢巴马汀(L-tetrahydropalmatine,L-THP)对全脑缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法:采用Pulsinelli阻塞四血管的方法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型.试验分三组:假手术组(S组),全脑缺血再灌注生理盐水组(IR组),全脑缺血再灌注左旋四氢巴马汀治疗组(T组).每组按再灌注时间的不同,分2h、6h、12h、24h和48h五个亚组,每个亚组各五只健康雌雄不拘的Wistar大鼠.T组于再灌注时及以后每间隔6h给予等量的左旋四氢巴马汀注射液(0.5ml/kg,15mg/kg)腹腔内注射(ip.),IR组于再灌注时及以后每间隔6h给予等容量的生理盐水(0.5ml/kg)腹腔内注射.NF-κB、IκBα采用免疫组织化学方法(链霉亲合数(StreptAvidin)-生物素(Biotin)-酶复合物(Enzyme Complex)法-SABC法)检测,TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、IL-10 mRNA采用原位杂交组织化学方法(in situ hybridization histochemistry,ISHH)进行检测,并用图像分析系统计算阳性细胞的吸光度值(A);凋亡细胞数目用原位末端标记法(in situ end labeling technique,TUNEL)检测,光镜下计数阳性细胞数目.结论:1.NF-κ B、TNF-αmRNA和IL-1βmRNA参与了全脑缺血再灌注损伤;IL-10可能对全脑缺血再灌损伤有保护作用.2.NF-κ B的激活介导了TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达,在脑缺血再灌注的炎症反应中可能处于中心环节;NF-κB的激活对IL-10 mRNA的表达无影响.3.左旋四氢巴马汀可通过减少IκBα的降解,抑制NF-κB、TNF-αmRNA和IL-1β mRNA的表达,而对全脑缺血再灌注损伤起保护作用.
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