苦参粗提液中氧化苦参碱和苦参碱的分离与纯化

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生物碱是中草药和其他药用植物的有效成分,建立科学高效、简便易行的分析与纯化方法对中药工业现代化具有重要意义。氧化苦参碱和苦参碱作为苦参生物碱中的有效成分,对抗炎、抗纤维化、抗病毒、神经系统、心血管系统等有广泛的药理作用。本文对氧化苦参碱和苦参碱分离纯化的工艺条件进行了详细的研究,旨在探索到简单、合理的分析、分离纯化工艺,为工业化生产提供基础数据。论文首先建立了高效液相色谱法同时测定苦参粗提液中氧化苦参碱和苦参碱含量。以AichromBond-AQ C18(4.6mm×250mm,5μm)为固定相,甲醇:0.05%三乙胺水溶液(70:30, v/v)为流动相,紫外检测波长为215nm,流速为1.00mL/min,柱温为30.0℃。苦参碱和氧化苦参碱分别在0.02~160mg/L和0.04~100mg/L范围内有良好的线性关系。采用静态吸附法,在水、盐酸、氨水三个体系中分别测定了氧化苦参碱和苦参碱在Purolite Ca型离子交换树脂上的吸附行为,作为分离纯化工艺的基础。以氧化苦参碱和苦参碱的产率作为指标,利用正交设计实验法优化苦参粗提液中的氧化苦参碱和苦参碱在Purolite Ca型离子交换树脂上的分离纯化的条件:料液比为1:16、上样体积为0.5mL、层析柱高径比为20:1、氨水与乙醇配比为4:4、流速为1.5mL/min,该条件下氧化苦参碱和苦参碱的产率分别为49.49%和55.28%。在正交设计实验数据的基础上,采用人工神经网络法进一步优化氧化苦参碱和苦参碱分离纯化的工艺参数,高径比为10:1、上样体积为0.2mL、料液比为1:10、流速为1mL/min、氨水与乙醇的配比为4:4的条件下,氧化苦参碱和苦参碱的产率较高,预测产率分别为51.50%和59.44%,实际产率分别为52.98%和60.71%;高径比为10:1、上样体积为0.2mL、料液比为1:8、流速为1mL/min、氨水与乙醇的配比为4:4的条件下,单一组分的氧化苦参碱产率较高,预测产率为64.95%,实际产率为63.88%;高径比为10:1、上样体积为0.2mL、料液比为1:16、流速为4mL/min、氨水与乙醇的配比为4:4的条件下,单一组分的苦参碱产率较高,预测产率为64.45%,实际产率为66.27%。在最佳分离纯化条件基础上,采用溶剂萃取法对氧化苦参碱和苦参碱进一步纯化得到产品结晶,测得氧化苦参碱和苦参碱的纯度分别为92.36%、95.72%。
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