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第一部分低强度脉冲超声对离体大鼠膀胱平滑肌收缩的影响目的:通过观察低强度脉冲超声(LIPUS)对离体大鼠膀胱平滑肌收缩的影响,讨论LIPUS是否可为产后尿潴留提供一种新的治疗方法,并初步探讨其影响机制。方法:1、制备32段SD雌性大鼠膀胱平滑肌肌条;2、根据不同处理条件将肌条随机分为超声辐照组、超声辐照+尼莫地平组(L-型钙通道阻滞剂)、超声辐照+低分子肝素组(IP3受体拮抗剂)及对照组;3、采取BL-410F机能系统测量并记录超声辐照组、超声辐照+尼莫地平组、超声辐照+低分子肝素组的膀胱肌条在低强度脉冲超声辐照前、后的收缩曲线图,并比较各组膀胱肌条收缩的频率和幅度;4、收集对照组和超声辐照组辐照后的膀胱平滑肌组织,通过石蜡包埋、切片、HE染色,然后在显微镜下观察其组织病理学变化。结果:1、与LIPUS辐照前比较,超声辐照组的膀胱肌条在LIPUS辐照后的收缩频率和幅度明显增加(P<0.05);2、超声辐照+L-型钙通道阻滞剂的膀胱肌条的收缩频率和幅度明显降低(P<0.05);3、超声辐照+ip3受体拮抗剂的膀胱肌条的收缩频率和幅度无明显变化(p>0.05)。4、组织病理学观察结果揭示了超声辐照组与对照组的膀胱平滑肌细胞无明显差异。结论:膀胱平滑肌细胞膜上的l-型钙通道可被低强度脉冲超声激活,从而引起离体大鼠膀胱平滑肌的收缩幅度和频率增加。第二部分低强度脉冲超声影响膀胱平滑肌收缩的信号转导机制研究目的:探究lipus是否通过l-型钙通道激活的钙离子信号通路来增加细胞内ca2+浓度引起膀胱平滑肌收缩增强。方法:用酶消化法提取膀胱平滑肌原代细胞,并用其特异性抗体a-actin染色鉴定;cck-8试剂盒分别检测不同超声强度(0.5w/cm2,1.0w/cm2,1.5w/cm2)及不同作用时间(10s、20s、30s、40s、50s)下的细胞生存率;使用倒置荧光显微镜及流式细胞仪分别检测对照组、超声辐照组、尼莫地平组、尼莫地平+超声辐照组细胞内ca2+荧光强度及浓度情况。结果:膀胱平滑肌细胞(bsmcs)提取并鉴定成功;0.5w/cm2的超声辐照强度,作用时间20s时,细胞生存率在90%以上,后续研究采用0.5w/cm2,20s作为bsmcs的超声辐照强度与时间;与对照组相比较,超声辐照组bsmcs内ca2+荧光强度及浓度显著增加(p<0.05),此外,l-型钙通道阻滞剂可抑制超声作用bsmcs后胞内ca2+浓度(p<0.05)。结论:LIPUS可通过激活L-型钙通道的Ca2+信号通路促进膀胱平滑肌收缩;LIPUS可能为产后尿潴留提供一种新的治疗方法。