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我国农业生产一直饱受病虫害的困扰,而我国是世界农业大国,同时也是多发农业害虫灾害国家。长期以来对于防治病虫害,我们一直使用大量的化学农药。虽然取得了显著的成效但也给人类的健康以及自然环境造成了危害。生物防治是解决这一系列问题的最佳途径。苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)是世界上应用范围最大的杀虫微生物,但是目前投入应用的Bt野生菌株存在杀虫谱窄、毒力低等缺点,因此我们需要通过筛选新型高毒力的Bt野生菌株来满足生物防治的需求,同时为转基因植物或微生物提供新的基因来源。本研究对来自黑龙江省哈尔滨市横头山国家森林公园的200个土壤样品进行了苏云金芽胞杆菌的分离,获得12株Bt菌株。经过生物学多样性分析选取3株菌进行晶体形态分析、杀虫晶体蛋白表达谱分析及室内杀虫活性测定。晶体形态包含:球形,长、短双锥体形,立方体形。SDS-PAGE结果显示菌株HTS-S-12表达130kDa的蛋白,菌株HTS-S-38和HTS-S-69表达130kDa和60kDa的蛋白。初步室内杀虫生物活性测定表明菌株HTS-S-38、 HTS-S-69对甜菜夜蛾、亚洲玉米螟有很高的生物活性。对菌株HTS-S-38进行复筛,未得到有效的半致死浓度数据。经过PCR菌株HTS-S-38含有crylAa, crylAc, crylIa, cry2Ab, vip3Aa基因,同时还含有AiiA基因和chi基因。cry2Ab基因在GenBank中的注册登录号为KJ010821,经过Bt δ-内毒素基因国际命名委员会正式命名为cry2Ab31。vip3Aa基因与已命名的vip3Aa43同源性为100%。虽然菌株HTS-S-38未显示出广谱杀虫活性,但其对鳞翅目昆虫的高活力为生物农药工程菌提供了良好的菌株基础。它含有的多种杀虫基因为杀虫毒理提供了更多的研究素材,对Bt生物防治具有十分重要的意义。