清凉冲剂对高温下鸡细胞免疫的影响及体外药效学评价研究

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通过研究高温应激状态下清凉冲剂对鸡免疫器官中CD4~+、CD8~+T细胞及IL-2含量的动态变化影响,来阐明清凉冲剂对机体细胞免疫机能的作用效果;通过研究组成清凉冲剂各中药在不同培养条件下对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响及培养上清液中IL-2含量变化来探讨各中药的作用机理,为研究清凉冲剂药理作用和组方机理提供理论依据。108只农大3号35日龄商品鸡,随机分为常温对照组、高温对照组和高温用药组,每组36只,用药组饲喂中药煎剂,喂药量与饲料量比为1:1000。分别于实验的第1、4、8、10天各组剖杀5只,分别取胸腺、脾脏和法氏囊,利用免疫组化方法测定各免疫器官中CD4~+、CD8~+T细胞及IL-2含量。在离体小鼠脾脏淋巴细胞培养液中分别加入石膏、黄柏、苍术、藿香、苍术油和藿香油后,置于37℃、39℃和42℃的CO2培养箱中培养,测定细胞经ConA作用后淋巴细胞增殖和分泌IL-2的能力变化。结果显示,高温过程中,用药组免疫器官中CD4~+、CD8~+T细胞水平均高于高温对照组,且以第8天最明显,差异极显著(P<0.01);用药组免疫器官中IL-2水平高于高温对照组,差异极显著(P<0.01)。淋巴细胞培养试验中,39℃、42℃培养条件下,均能不同程度抑制淋巴细胞的增殖;石膏低剂量组(0.05μg/ml)在42℃培养1小时条件下能够明显协同ConA促进淋巴细胞增殖,差异显著(P<0.05)。黄柏、苍术和藿香高剂量组(500μg/ml)在39℃、42℃不同时长培养条件下,均能够极明显协同ConA促进淋巴细胞增殖,差异极显著(P<0.01)。苍术油中剂量组(1μg/ml)在不同条件下能够协同ConA促进淋巴细胞增殖,差异不显著(P>0.05)。藿香油低剂量组(0.01μg/ml)在不同条件下能够协同ConA促进淋巴细胞增殖,差异不显著(P>0.05)。细胞培养上清中IL-2的含量随着温度的升高呈现升高的趋势,其中以42℃升高最显著;加中药各组除藿香油试验C组外,均表现出明显降低培养上清中IL-2的含量,3组中均以石膏组降低最为显著。本研究证实,清凉冲剂可以通过提高高温环境下鸡免疫器官中CD4~+、CD8~+T细胞及IL-2的含量达到增强鸡的细胞免疫水平;不同培养温度条件下,组成清凉冲剂各中药均能协同ConA刺激淋巴细胞增殖,其中以藿香协同ConA刺激淋巴细胞增殖效果最明显;清凉冲剂各中药在体外淋巴细胞急性热应激情况下均具有下调IL-2含量的作用。
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