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鲍曼不动杆菌是医院感染的重要条件致病菌之一,在医院环境中可长期存在,特别是机体抵抗力低下或免疫功能受损时更易出现相关的院内感染。近年来随着广谱抗菌药物的广泛应用,耐碳青酶烯类的鲍曼不动杆菌日益增多,甚至出现了全耐药株,给临床医疗使用抗感染药物带来了新的挑战。目前,整合子系统作为细菌耐药产生及传播的重要机制已经得到了许多研究者的关注,越来越多的证据表明其与临床多重耐药菌株的产生及流行有着很密切的联系。本课题分析鲍曼不动杆菌中整合子的存在特点和流行趋势,及研究金属酶对碳青霉烯类药物耐药方面的作用机理,从而为临床上选择合理的抗生素提供理论依据。本课题采用常规实验室方法分离鉴定由临床收集的鲍曼不动杆菌129株,用MIC和K-B法相结合的方法对该菌进行药敏研究,了解细菌在医院中的耐药特点和分布情况。设计不同的引物用PCR的方法扩增整合子及其可变区,以了解整合子在鲍曼不动杆菌中的分布特点及其携带的耐药基因盒的种类。129株细菌中检测出1类整合子74株(57.4%),未检出2、3类整合子。PCR扩增1类整合子可变区,发现其携带的基因盒以2000bp、2500bp、800bp和350bp大小的片段占优。对PCR产物测序分析整合子所携带的基因盒类型,有五种:dfrⅦ,dfrA1-orfC、aacA4-aadB、dfrA12-orfF-aadA2、aacA4-catB8-aadA1。采用双纸片增效法和协同法对耐亚安培南或美罗培南的65株细菌进行金属酶的表型筛选,共检出产金属酶的细菌18株。设计金属酶基因IMP-1、VIM-2、SIM-1引物对细菌进行检测。PCR扩增后检测出VIM-2型,未检出IMP-1和SIM-1型。经DNA测序与网上Genbank序列同源性比较分析证实为VIM-2型金属酶。采用肠杆菌间重复序列PCR(ERIC—CR)的方法对65株亚胺培南或美罗培南耐药的临床菌株进行了基因分型的分析。确定其同源性,为进一步了解菌株的耐药情况在院内的流行趋势和特点提供依据。结果发现检出的菌株含有20种不同的基因型,并且以A型和B型克隆流行为主要趋势。