拟南芥凝集素类受体激酶基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2的作用机制研究

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类受体激酶(Receptor-like kinase, RLK)家族是植物细胞感受与传递胞外信号的重要家族,这一家族在植物的生长与发育以及生物、非生物胁迫应答等方面具有重要功能。而RLK的一个亚家族凝集素类受体激酶(Lectin-like receptor kinases, LecRLK)家族成员则在免疫、胁迫和激素等应答方面具有关键作用。LecRLK家族的个别成员还参与了花粉发育过程。基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2是通序列比对得到的LecRLK家族中L型的成员,但目前还没有对这两个基因的相关研究。本文通过生物信息学分析,发现基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2具有典型的LecRLK结构,其胞外为类大豆凝集素结构域,中间为单次跨膜结构域,而胞内为丝氨酸/苏氨酸激酶结构域。这两个基因启动子区域具有多种光响应元件、伤害胁迫响应元件和激素响应元件等。在基因表达上这两个基因在整个植物周期表达量都很低。这些结果都表明基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2具有响应细胞外的胁迫、光等信号的作用。序列比对发现这两个基因具有很高的同源性。亚细胞定位实验验证了基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2是定位于细胞膜,而酵母双杂交与BIFC实验则显示这两个基因是通过形成同源二聚体的模式行使功能。以基因LecRKⅢ.2所表达的蛋白的胞内段为诱饵筛取了拟南芥的cDNA文库,为探究两个基因参与的信号通路提供重要依据。同时鉴定了基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2的三个纯合缺失突变体lecrkill.1-1、lecrkill.1-2、lecrkill.2-1,并构建了基因LecRKⅢ.2过表达株系,为进一步深入探究这两个基因的生物学功能奠定基础。
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