PEI/PEGMA-b-MAH/pDNA三元非病毒载体复合物的设计与制备

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聚(乙烯亚胺)(PEI)作为一种典型的聚阳离子非病毒基因载体材料,具有正电荷密度高和缓冲能力强的特点。然而,随着分子量的增大,PEI的转染效率随之增大,但同时伴随着毒性的增强。为了得到高转染效率且低毒性的PEI基基因载体材料,本文采用共混的方法制备了非共价的自组装三元复合物。首先,我们设计了一种功能性两嵌段共聚物PEGMA-b-MAH,该共聚物是通过大分子引发剂聚(聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯)(P(PEGMA))引发L-甲基丙烯酰组氨酸甲酯(MAH)单体采用可逆加成一断裂链转移(RAFT)聚合的方法制备而成。然后,合成的共聚物先后与质粒DNA和PEI(Mw=10 kDa)共混,制备得到三元复合物纳米粒子。凝胶电泳测试和动态光散射(DLS)测试表明该复合物对DNA具有良好的压缩能力,且在血清中具有理想的稳定性。体外转染实验和MTT测试表明三元复合物的毒性较低,且与对照组相比,能够有效转染人宫颈癌(HeLa)细胞和人肝癌(HepG2)细胞,甚至在最优N/I/P时,在有血清培养基条件下转染HeLa细胞的转染效率较PEI-25k/pDNA复合物更高。这表明,非共价的共混组装的方法为改性PEI并增强其转染效率提供了一种新的方法。
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