自由生活线虫作为指示者在垃圾渗滤液毒性评价的应用

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垃圾渗滤液是卫生填埋过程中产生的高浓度有机废水,其成分复杂,环境危害性大,需使用一系列的组合式工艺进行处理以达到排放标准。对渗滤液及组合式工艺处理后的尾水的监测常采用物理化学监测,该监测无法反映渗滤液的生物毒性和生态毒性。秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)是一种自由生活的食细菌线虫,具有世代周期短、对环境反应敏感等特性,被广泛应用于污染物的生物毒性检测。而各种类型的土壤中存在大量的自由生活线虫物种,共同组成了多营养级的线虫群落,在土壤物质循环中发挥重要作用,在污染物的生态评价中具有潜在优势。由此,本研究以上海老港填埋场渗滤液及不同处理工艺的尾水为材料,采用秀丽隐杆线虫和自由生活线虫群落分别评估垃圾渗滤液的生物毒性和生态毒性,探究线虫作为垃圾渗滤液毒性评价指示者的可行性,为填埋场垃圾渗滤液的减毒处理工艺和尾水排放提供科学依据。主要研究结果如下:1、通过模式种秀丽隐杆线虫的生存、生长、运动和繁殖等指标,评估不同工艺垃圾渗滤液尾水的生物毒性,结果显示:1)经渗滤液原液(RAW)、原位微生物池(RM)和厌氧生物反应池(A)的尾水暴露的线虫24h死亡率均达75%以上,好氧生物反应池(O)和膜生物反应器(MBR)处理的线虫24h死亡率显著高于矿化垃圾床(ARB)、纳滤和反渗透技术(NF+RO)和对照(CK);2)经过MBR和ARB处理暴露后的线虫的体长在48h内的增长均显著低于NF+RO和对照,可见MBR和ARB处理可抑制线虫生长;3)线虫身体弯曲频率和头部摆动频率对不同工艺尾水的响应不一,MBR尾水处理可导致线虫不育,但是ARB和NF+RO处理的线虫产卵数和卵孵化率与对照没有显著差异。上述结果表明,秀丽隐杆线虫的死亡率与生理指标的结合可良好指示垃圾渗滤液处理工艺尾水的生物毒性。2、通过构建多营养级的线虫群落微生态箱评估渗滤液的生态毒性,研究发现:1)与对照相比,添加垃圾渗滤液原液(RAW)导致线虫密度、属丰度、辛普森指数、香农多样性指数在各暴露时间的下降最严重,其次为厌氧生物反应池(A)和膜生物反应器(MBR),而纳滤和反渗透技术(NF+RO)与对照没有差异,表明垃圾渗滤液不同工艺尾水对线虫多样性的影响依次为:RAW>A=MBR>NF+RO=CK;2)线虫群落结构在不同处理工艺尾水间的差异随暴露时间的增加而增加,可见垃圾渗滤液对土壤生物群落的生态毒性具有一定时序性和持久性;3)在功能群水平上,以腐烂有机质碎屑为食的非选择性沉积食性线虫(1B)和食藻类的刮食者线虫(2A)是线虫群落中占据主导地位的营养类群,其中1B对渗滤液敏感,可作为监测渗滤液毒性的指示类群;4)渗滤液原液暴露显著增加了线虫群落的成熟指数(MI)、富集指数(EI)和结构指数(SI),并降低了代谢足迹(NMF),可见渗滤液的添加可为土壤提供一定的营养,但对土壤生物的生态功能仍具有一定的负面影响。上述结果表明,线虫群落可从多样性、食物网状况、功能等多个层面全面评估渗滤液和不同工艺尾水的生态毒性。3、通过对微生态箱土壤理化因子、微生物和线虫群落的联合分析,探究渗滤液原液和各处理尾水添加对线虫群落的影响机制,研究发现:1)渗滤液添加显著改变了土壤理化性质,渗滤液原液使微生态箱中土壤的氨氮含量显著增加,原液RAW、A池和MBR尾水使土壤电导率明显上升;2)渗滤液添加显著改变了微生物群落,微生物群落的多样性随处理工艺的延伸(从RAWA-MBR-NFRO)逐渐升高,优势细菌门Bacteroidete对渗滤液原液有着较高的耐受性,稀有细菌类群对渗滤液毒性敏感;3)Mental检验显示土壤氨氮、p H和电导率对微生物有显著影响,冗余分析(RDA)进一步显示土壤氨氮和电导率是影响线虫的主要因子,微生物群落能显著影响线虫群落;4)分段结构方程建模(Piecewise SEM)可见渗滤液添加直接提高了土壤的污染水平,从而间接导致了线虫密度的下降,并改变线虫食性类群组成,由于土壤生态功能受到线虫食性类群组成直接的正面影响,所以土壤生态功能水平也随之下降,这揭示了垃圾渗滤液添加抑制土壤生态功能的潜在途径。
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