131I-herceptin对卵巢癌细胞skov-3的化疗增敏作用

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目的:卵巢癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,虽然发病率仅占第三位,但其死亡率位居妇科恶性肿瘤之首,5年生存率约为30%,且病死率有逐年增加的趋势。卵巢癌由于发现较晚,手术时机多已失去,普通的化疗、放疗由于化疗药物耐药及放疗抵抗等原因,疗效有限。本实验通过免疫靶向治疗的方法,探索Her-2高表达类型卵巢癌的新治疗方法。观察131Ⅰ标记的曲妥珠单抗(trastuzumab,商品名herceptin)对Her-2高表达的卵巢癌细胞skov一3的化疗增敏作用。方法:应用IodOgen法将131Ⅰ标记到herceptin上,并测定放化学纯度、放射性浓度、免疫结合率、Herceptin标记率、放射性比活度进行质量控制,制备131I-herceptin.实验设空白组、131I-herceptin组、顺铂(DDP)组、131I-herceptin和顺铂(DDP)联合组。MTT法测定不同浓度顺铂(DDP)和131I-herceptin以及顺铂(DDP)和131I-herceptin联合对skov-3的生长抑制率,并画出生长抑制率曲线。流式细胞仪分别测四组不同处理的凋亡率。采用免疫组化法分别检测未处理的skov-3和131I-herceptin作用48小时后的skov-3的Her-2和survivin表达情况,并比较作用前后的表达率。结果:MTT法测得顺铂(DDP)生长抑制率并根据生长抑制率曲线得出4.685μg时为80%、3.760μg时为70%、2.75μg时为60%、2.320μg时为50%、2.020μg时为40%、1.560μg时为30%、1.130μ g时为20%。MTT法测得131I-Herceptin生长抑制率,根据生长抑制率曲线得出生长抑制率为10%时131I-Herceptin的浓度为0.75×105Bq/ml。MTT法测得各浓度联合组的生长抑制率明显高于相加组,P<0.05。应用金氏公式计算各组DDP与131I-Herceptin相互作用q值,得出q值均大于1。根据CDI(两药相互作用指数)计算得出各联合组CDI(两药相互作用指数)均小于1。流式细胞仪测得skov-3细胞的凋亡率随药物浓度的降低而减小。各浓度联合组的凋亡率要明显高于单药顺铂(DDP)组和131I-Herceptin组,P<0.05。并且各浓度联合组的凋亡率明显高于相加组,P<0.05。131I-Herceptin组处理后Her-2标记指数由36%降至21%,survivin基因标记指数由21%降至12%。结论:1.131I-herceptin对卵巢癌细胞skov-3有化疗增敏作用。2.增敏机制可能为:131I-Herceptin下调卵巢癌细胞skov-3的Her-2和survivin基因的表。
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