油茶籽壳中茶皂素的提取纯化及性质初步研究

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论文以油茶籽壳与油茶蒲为原料,对其基本成分进行测定,从油茶蒲与油茶籽壳中提取、分离、纯化得到茶皂素,并对其性质进行分析。本论文主要研究内容如下:(1)本论文分别测定油茶蒲与油茶籽壳中各成分,结果表明:油茶蒲中各成分分别为:茶皂素10.27%,粗脂肪0.91%,总蛋白2.84%,总糖10.75%,总黄酮2.45%,纤维素15.67%,还原糖2.59%;油茶籽壳中各成分含量分别为:茶皂素19.26%,粗脂肪1.93%,总蛋白1.53%,总糖8.43%,总黄酮2.11%,纤维素14.85%,还原糖3.92%。(2)分别对油茶蒲和油茶籽壳用水提法和醇提法浸提茶皂素,通过采用单因素实验和正交实验,结果表明:水提油茶籽壳最佳条件为:浸提时间为3h,浸提温度为75℃,固液比为1:12;水提油茶蒲最佳条件为:提取温度80℃,提取时间3h,料液比1:14;醇提油茶籽壳最佳条件为:提取时间3h,提取温度70℃,料液比1:12,乙醇浓度95%;醇提油茶蒲最佳条件为:提取时间3h,提取温度70℃,料液比1:12,乙醇浓度95%。醇提法得到的皂素颜色浅,纯度高,并且浓缩时不会产生大量气泡,因此使用乙醇法提取皂素进行进一步纯化。(3)在茶皂素的脱色方面使用较传统的方法加入H2O2进行脱色研究,通过采用单因素实验和正交实验,研究了p H值、加热时间、H2O2加入量、加热温度对H2O2脱色效果的影响,得到了最佳的脱色条件为:p H10,双氧水加入量为4ml/g,加热温度为80℃,加热时间60min。以经过处理了的油茶籽壳乙醇提取物作为原料,考察几种树脂对茶皂素的吸附效果和解吸情况,确定了D101树脂对茶皂素的吸附和洗脱效果较理想。其最佳吸附条件为:上样液茶皂素浓度20mg/ml,上样流速为3BV/h,在此条件下吸附率为68%。最佳解吸附条件为:洗脱剂乙醇浓度为85%,洗脱流速为2BV/h,洗脱剂体积为5BV,最终解吸率为82%。D101树脂的最大吸附量为60mg/ml。树脂使用3次后可再生使用。纯化后的茶皂素产品中杂质的含量明显降低,产品粘稠度与纯化前相比也明显降低,产品纯度显著提高。通过采用大孔吸附树脂D101对从油茶籽壳中提取出的粗茶皂素纯化进行洗脱的研究,得到纯度为90.2%的油茶籽壳皂素和89.1%的油茶蒲皂素。(4)将提取的油茶蒲皂素和油茶籽壳皂素与实验室以前提取的油茶粕皂素进行性质表征,包括呈色反应、起泡性、HPLC-UV分析,并对油茶籽壳皂素进行UPLC/Q-TOF MS分析,测试结果如下:三种皂素和10%的α-萘酚乙醇溶液反应呈现紫色圆环;和醋酐反应刚开始是分层的,振摇之后溶液显示红色,放置一段时间溶液显示为紫色;三种皂素都具有明显的特征反应。三种茶皂素的起泡力都强并且稳泡性很好。经HPLC-UV分析发现3种皂素都含有一种皂甙,根据出峰时间和含量大小推测可能是茶皂甙A2。将茶籽壳皂素进行UPLC/Q-TOF MS分析,发现3种皂甙,推测可能是茶皂甙A2,山茶皂甙B1和山茶皂甙B2,阿萨姆皂甙F。
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