氨基酸和1-羟基芘的同步荧光分析方法研究

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本文应用同步荧光分析法及一阶导数同步荧光分析法分别测定了人尿中的1-羟基芘和啤酒中的芳香族氨基酸,方法操作简单、快速,应用于实际样品的测定,结果令人满意。论文第一部分介绍了同步荧光分析方法的基本原理及其在环境科学、食品科学、药物分析和临床检验等领域的应用研究进展,并简介了同步荧光扫描技术与导数技术、化学计量学方法、低温技术、偏振技术以及其它技术的联用情况。第二部分研究了色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的同步荧光及一阶导数同步荧光的光谱特征,提出了同时测定混合体系中三种氨基酸的荧光分析方法。以同步波长差△λ=70nm进行同步荧光扫描,色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的同步特征峰(以激发波长表示)分别位于280、228和206nm。酪氨酸和苯丙氨酸可直接由同步特征峰的信号强度进行定量,色氨酸的同步特征峰略受酪氨酸的弱峰影响,采用一阶导数处理后,即可消除干扰,从而实现对色氨酸的定量测定。色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的线性响应范围分别为1.0×10-8~8.0×10-6、5.0×10-8~3.0×10-6和8.0×10-7~3.0×10-5mol/L,检出限分别为6.9×10-9、3.8×10-8和4.2×10-7mol/L,相对标准偏差(RSD)分别为1.4%、2.5%和3.2%(n=11)。方法无需预分离过程,可用于啤酒与复方氨基酸注射液中三种芳香族氨基酸的直接测定。第三部分建立了一种测定人尿中1-羟基芘(1-OHP)的同步荧光分析方法。实验基于在pH为2.5的Britton-Robinson缓冲溶液中,同步波长差△λ为34nm的条件下,吐温20对1-羟基芘的同步荧光信号具有增敏作用,测定了人尿中的1-羟基芘。在选定的实验条件下,方法的线性范围为2.5×10-10~5.0×10-7mol/L,检出限为9.5×10-11mol/L对1.0×10-7mol/L的1-OHP溶液进行11次平行测定的相对标准偏差为0.78%。方法简单快捷,选择性好,灵敏度高。应用于实际尿样的测定,回收率在93.8%~107%之间。第四部分对实验内容及所建立的分析方法的特点进行了简要的总结。
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