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山茱萸为我国传统中药材,具有多种生物活性,本文探讨了新型微波辅助提取山茱萸有效活性成分的工艺参数以及山茱萸各分离组分的体外降血糖活性,主要研究内容如下:1、通过新型微波设备辅助提取山茱萸中的活性成分,经过单因素实验和响应面模型优化,在考察乙醇浓度、提取温度、提取时间、料液比等四个试验因素的基础上,确定了山茱萸活性成分的最佳提取工艺参数为:乙醇浓度30%,料液比1:11,提取温度90℃,提取时间7.7min。通过验证试验得到的最优提取率:环烯醚萜总苷为152.71±2.17mg/g,总多酚为51.89±1.52mg/g,总五环三萜酸为34.11±0.94mg/g。此外,与控制微波功率相比,控制提取温度更能准确和有效地控制提取过程,在保证提取物稳定性前提下,乙醇用量和提取时间均远低于传统微波提取方法。2、山茱萸粗提物经不同极性溶剂萃取得到水相(Fr.H)、正丁醇相(Fr.Bu)、乙酸乙酯相(Fr.Et)、三氯甲烷相(Fr.Ch)、石油醚相(Fr.Pe),Fr.Bu和Fr.Et经大孔树脂吸附,梯度乙醇(10%、30%、50%、70%、90%)依次洗脱得到10种组分(Fr.Bu-1、Fr.Bu-2、Fr.Bu-3、Fr.Bu-4、Fr.Bu-5、Fr.Et-1、Fr.Et-2、Fr.Et-3、Fr.Et-4、Fr.Et-5),通过α-葡萄糖苷酶抑制试验来研究山茱萸不同组分的α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,Fr.Bu、Fr.Et、Fr.H均具有较高的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中正丁醇30%乙醇洗脱相(Fr.Bu-2)和乙酸乙酯30%乙醇洗脱相(Fr.Et-2)最强,1mg/mL浓度下抑制率分别达到74.4%和73.6%,远优于阳性对照。动力学实验发现,Fr.Bu-2的抑制类型为非竞争性抑制,Fr.Et-2为竞争性抑制。通过HPLC-PAD-ELSD-MS分析,Fr.Bu-2中主要成分为马钱苷和莫诺苷,Fr.Et-2主要成分为熊果酸和齐墩果酸。3、通过HepG2肝癌细胞葡萄糖摄取实验,研究山茱萸不同组分的体外降血糖活性,扣除提取物对细胞的毒性作用,Fr.Bu-2、Fr.Et-2、马钱苷、莫诺苷、熊果酸、齐墩果酸对HepG2细胞葡萄糖摄取均有促进作用,且呈剂量依赖性,浓度越高,促进作用越强。受试组分在0.5mg/mL浓度下,单位细胞葡萄糖净摄取量分别为对照组的:2.76倍(Fr.Bu-2)、2.87倍(Fr.Et-2)、2.97倍(马钱苷)、1.41倍(莫诺苷)、2.13倍(熊果酸)、2.37倍(齐墩果酸)。4、HepG2肝癌细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖摄取实验表明,Fr.Bu-2、马钱苷、莫诺苷、齐墩果酸在高浓度时均能促进模型细胞的葡萄糖摄取,受试组分在0.5mg/mL浓度下,单位模型细胞葡萄糖净摄入量分别为对照组的:1.88倍(Fr.Bu-2),1.61倍(马钱苷)、1.09倍(莫诺苷)、1.23倍(熊果酸)、1.26倍(齐墩果酸)。