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原发性支气管肺癌简称肺癌,是人类最常见的恶性肿瘤之一,其发生率和死亡率很高。绝大多数肺癌起源于支气管粘膜上皮,故亦称支气管肺癌。近60年来,世界各国肺癌的发病率和病死率均迅速上升,是男性癌症患者首要原因。临床上肺癌主要包括非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)和小细胞肺癌,约80%～85%的肺癌患者属于NSCLC。NSCLC在肺癌组织分型最为常见,但很多患者确诊时己为晚期。肺癌的侵袭与转移是一个复杂、多步骤、多环节的过程,涉及肿瘤细胞增殖、粘附、运动、降解基膜和细胞外基质等情况。正常肺泡上皮基底膜是由Ⅳ型胶原等成分构成,是一致密的网状结构,可固着细胞不能正常通过。基质金属蛋白酶9(matrix metallo proteinase9, MMP-9)是基质金属蛋白酶家族(matrix metallo proteinases, MMPs)中与降解Ⅳ型胶原有关的主要酶类,MMP-9和其特异性抑制剂组织金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitors of metalloproteinase-1, TIMP-1)在肿瘤细胞的侵袭和转移灶的形成过程中起重要作用。同时,NSCLC又是一个典型的血管依赖性病变,新生血管的形成促进了肿瘤的生长、浸润和转移,研究表明,当肺癌组织生长到直径1～2mm时,其进一步生长就需要新的血管生成,而新的血管生成又增加了肿瘤转移的机会。微血管密度(microvascular denstity, MVD)是衡量肿瘤血管生成的量化指标,有研究将其作为肿瘤血管形成标志来研究与肿瘤的关系。CD105抗体是目前公认较敏感的血管标记物,具有染色强、背景清晰、易计数等优点,通过对其进行表达检测,可显示肿瘤内微血管的数量及密度,反映肿瘤组织MVD,以MVD值量化肿瘤血管生成情况,从而定量的分析肿瘤微血管增生情况,有研究将MVD检测做为定量分析肿瘤血管生成的金指标。本研究应用免疫组化SP法和Western blot法检测NSCLC及癌旁组织中MMP-9和TIMP-1的表达情况,应用免疫组化SP法检测NSCLC及癌旁组织中CD105抗体表达情况,并以其衡量MVD,以期更全面地了解它们在NSCLC中的生物学作用及其表达与临床病理特征的相关性。[目的](1)探讨NSCLC组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)和其特异性抑制剂组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达及其与肿瘤生物学行为的关系；(2)探讨NSCLC组织中CD105抗体的表达及微血管密度(MVD)检查与临床病理特征的相关性；(3)探讨检查MMP-9、TIMP-1及CD105抗体在诊断和治疗NSCLC的可能意义,试图寻找NSCLC诊断和预后判断有价值的肿瘤标记物。[方法]收集50例NSCLC蜡块标本和26例手术后确诊为NSCLC标本,①肉眼观察26例术后确诊为NSCLC标本组织大体形态学；②HE染色观察NSCLC组织和癌旁相应正常组织形态学改变及与临床关系；③应用免疫组化SP法检测76例NSCLC和癌旁正常组织中MMP-9、TIMP-1、CD105抗体的表达,并分析其表达与肺癌组织类型、肿瘤大小、TNM分期、分化程度、淋巴结转移的相关性。④Western blot检测26例手术标本CD105蛋白在NSCLC中的表达；⑤根据CD105抗体免疫组化结果,通过计算机图像分析研究血管密度与NSCLC肿瘤的关系；⑥SPSS for Windows13.0统计软件处理图像分析数据免疫组织化学平均光密度值和Western blot灰度值,探讨检查MMP-9、TIMP-1及CD105抗体在诊断和治疗NSCLC的可能意义。[结果]①26例手术后确诊为NSCLC标本中发生于主支气管和叶支气管的中央型(肺门型)16例(61.5%),源于肺段近肺周边部孤立结节的周围型肺癌9例(34.6%),源于末梢肺组织的弥漫型肺癌1例(3.9%)；②HE染色观察NSCLC组织学表现复杂,76例NSCLC鳞状上皮细胞癌(鳞癌)45例(59.2%),以中央型肺癌最为常见,尤其老年男性,与吸烟关系非常密切；76例NSCLC腺癌为31例(40.8%),多为周围型肺癌,女性患者较多。③MMP-9、TIMP-1及CD105抗体在肺癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。NSCLC中MMP-9、TIMP-1及CD105抗体表达与肿瘤的分化程度、临床分期、淋巴结转移、远处转移有相关性(P<0.05或P<0.01)。④Western blot结果显示,26例(?) NSCLC组织中CD105蛋白表达明显高于相应的正常的癌旁组织(P<0.05)。⑤通过计算机图像分析表明,微血管密度与NSCLC分化程度、临床分期、淋巴结转移呈正比,腺癌较鳞癌表达显著。[结论]①本地区NSCLC以中央型(肺门型)为主,其次是周围型肺癌,弥漫型肺癌较为少见。②HE染色表明,NSCLC癌旁相应正常组织(距癌原发灶10cm以上)可作为正常对照组；NSCLC组织学表现复杂,以鳞状上皮细胞癌(鳞癌)最为常见,腺癌次之；大细胞未分化癌(大细胞癌)少见。③MMP-9、TIMP-1及CD105抗体在NSCLC组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织,且与肿瘤的分化程度、临床分期、淋巴结转移、远处转移有相关性。④MVD值与NSCLC分化程度、临床分期、淋巴结转移呈正比,腺癌较鳞癌表达显著。⑤检测NSCLC中组织的MMP-9、TIMP-1及CD105抗体表达和微血管密度对判断肿瘤的恶性程度和估计预后有一定的意义。