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目的:研究miR-144对巨噬细胞脂质蓄积和炎症反应的作用,探讨miR-144对动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)的影响。方法:体外培养巨噬细胞,转染miR-144后,检测细胞内脂质蓄积,检测培养上清中炎症因子水平的水平;探讨miR-144是否与c-Fos 3 ’UTR靶向结合并抑制其表达;miR-144对巨噬细胞脂质蓄积及炎症因子分泌的作用及机制;miR-144对apoE-/-小鼠主动脉壁内脂质蓄积、血脂水平、As病变、c-Fos的表达水平和炎症因子表达高低的变化。结果:(一)实验结果表明,miR-144 mimic能够降低体外培养巨噬细胞内游离胆固醇、总胆固醇、以及细胞内脂滴体积和数量,miR-144的互补序列则可阻断以上效应,增加巨噬细胞内脂滴体积和数量,增加巨噬细胞内游离胆固醇和胆固醇酯的水平;酶联免疫实验证明miR-144 mimic明显降低巨噬细胞炎症因子包括IL-6、IL-1β、TNF-α的含量和水平,而miR-144反向核苷酸序列通过与miR-144的互补阻断miR-144的作用。(二)生物信息学分析发现miR-144具有靶向调控c-Fos的生物学基础;HEK 293T细胞转染c-Fos mRNA3’UTR克隆质粒后,miR-144模拟物组明显降低荧光素酶活性,检测数值降低,而miR-144互补序列反义核苷酸组荧光素酶活性被增加明显;体外培养人THP-1和小鼠RAW 264.7细胞,通过miR-144的处理,RT-PCR和Western blot结果表明,miR-144模拟物可以降低中体外培养细胞中c-Fos mRNA和蛋白质水平的表达,miR-144的反义核苷酸序列促进细胞中c-Fos mRNA水平和蛋白质水平表达;同时在miR-144模拟物可以降低细胞内炎症因子水平的表达,miR-144反义核苷酸序列的作用则相反。(三)动物实验分为miR-144模拟物组、miR-144反义核苷酸序列组及其各自对照组,miR-144内源性模拟物组动脉粥样硬化斑块跟对照组相比,明显减少,动脉壁内斑块的面积缩小;miR-144模拟物组小鼠动脉粥样病变内胶原纤维素含量明显较低。检查动脉粥样病变区域内c-Fos的表达情况,其表达水平明显降低。miR-144反义核苷酸序列组结果则相反。miR-144可明显抑制体内和体外巨噬细胞内c-Fos的表达水平,c-Fos的表达水平和动脉粥样硬化的发生发展有相关性。结论:①体外实验证实,miR-144能够降低巨噬细胞验证因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表达和分泌,降低细胞内脂质水平;②miR-144可以抑制巨噬细胞内c-Fos在蛋白和mRNA水平的表达,并且可以进一步降低巨噬细胞内炎症因子和脂质的水平;③体内实验证实,miR-144可以降低apoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型中c-Fos的表达,降低血脂水平、斑块内脂质含量和炎症相关因子的表达,达到影响动脉粥样硬化的作用。