槐耳清膏对人肝癌HepG-2细胞增殖及P-YAP蛋白表达的影响

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:superlhl2010
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
原发性肝癌是世界最常见的恶性肿瘤之一。流行病学调查结果显示,其发病率及死亡率均有上升趋势,严重危害人类健康。目前缺乏有效治疗药物,已知化疗药物有效率不超过20%,靶向药物如多激酶抑制剂索拉菲尼未能显著改善肝癌的治疗现状。寻找、研究有效的抗肝癌药物一直是肝癌治疗的热点问题。作为我国民间重要的药用抗肿瘤真菌,槐耳高效低毒的抗肿瘤特性一直受到人们的关注,基础研究表明槐耳能够增强机体免疫功能、抑制肿瘤血管生成、促进肿瘤细胞凋亡、对化疗药物有增敏和逆转其耐药作用,表现出多靶位的抗肿瘤功效。临床研究表明槐耳对原发性肝癌有独特的疗效,但具体机制尚未明确。Hippo通路是新发现的生长控制信号通路,它通过限制细胞增殖和促进细胞调亡来调控器官大小和发育。YAP(Yes-associated protein)是Hippo通路下游的一个转录激活子,在人肝癌细胞中大量表达,与肝癌发生密切相关。新近研究表明YAP的致癌性与其磷酸化水平有关,磷酸化后的YAP蛋白(P-YAP)可以抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。目的:本实验主要研究不同浓度的槐耳清膏对人肝癌HepG-2细胞增殖、凋亡及P-YAP蛋白表达的影响,初步探讨槐耳清膏抗肝癌的可能作用机制。方法:1.不同浓度槐耳清膏作用HepG-2细胞48h,采用倒置显微镜观察槐耳清膏对HepG-2细胞形态的影响。2.不同浓度槐耳清膏作用HepG-2细胞12h、24h、48h,采用CCK-8法观察槐耳清膏对HepG-2细胞增殖的影响。3.不同浓度槐耳清膏作用HepG-2细胞24h、48h,采用AnnexinV/PI双染色法检测槐耳清膏对HepG-2细胞凋亡的影响。4.不同浓度槐耳清膏作用HepG-2细胞1h、12h、24h,采用蛋白免疫印迹法(western blot)分析槐耳清膏对HepG-2细胞P-YAP蛋白水平表达的影响。结果:1.在倒置光学显微镜下,观察到槐耳清膏作用HepG-2细胞后梭型细胞体积逐渐缩小,胞膜皱折,松散成个体漂浮,散在分布。2.CCK-8增殖抑制试验结果显示:槐耳清膏能够显著抑制HepG-2细胞的增殖(P<0.05),呈时间和剂量依赖性。3. AnnexinV/PI双染色法试验结果显示:槐耳清膏能够促进HepG-2细胞的凋亡(P<0.05),呈时间和剂量依赖性。4. Western Blot实验结果显示:槐耳清膏作用HepG-2细胞1h,能够上调P-YAP蛋白的表达(P<0.05),呈剂量依赖性。槐耳清膏作用HepG-2细胞12h,P-YAP蛋白无明显影响,与对照组无显著差异(P>0.05),槐耳清膏作用HepG-2细胞24h,能够下调P-YAP蛋白的表达(P<0.05),呈剂量依赖性。结论:槐耳清膏能够抑制HepG-2细胞的增殖,诱导HepG-2细胞凋亡,呈时间和剂量依赖性,上调P-YAP蛋白的表达可能是槐耳清膏早期抗肝癌药效机制之一,随着时间条件改变,槐耳清膏可能启动了不同的抗肿瘤机制。
其他文献
本文选择位于云南玉溪地区的高原深水淡水湖泊—抚仙湖,结合多金属结核采矿系统的湖底采矿行走试验,通过对湖区水体化学组成、沉积物地球化学和间隙水地球化学的详细剖析,并通过
经过二十多年的改革开放,我国逐步从计划经济体制转入市场经济体制,国有经济从一些行业中逐渐退出,民营经济不断发展壮大并收购了一些中小型国有企业。其中,不少被收购的国有企业
目的:内耳具有复杂的管液体平衡系统,包括前庭阶和鼓阶高钠离子、低钾离子浓度的外淋巴液和中阶高钾离子、低钠离子浓度的内淋巴液,内外淋巴液离子成分的差别导致两者间80mV的电
目的探析全身麻醉下妇科腹腔镜手术复苏期采取精细化护理的临床效果。方法参研对象选取2016年11月至2018年1月本院收治的妇科腹腔镜手术患者2000例,按随机化分组原则均分成参
[目的]探索槐耳浸膏抑制肝癌细胞转移的机制,为槐耳浸膏在临床上治疗肝肿瘤提供理论依据。[方法]将高转移潜能人肝癌细胞系(MHCC97H)分别与槐耳浸膏(1.0mg/ml,3.0mg/ml,5.0mg
小组活动是合作学习理论应用于英语课堂学习活动的主要方式之一,也是交际理论兴起及推广的一种结果。现在小组活动已广泛应用于英美等国各类课堂。我国也有不少教师已经或正在
商务印书馆作为中国第一家现代出版机构,一个多世纪以来,以"昌明教育,开启民智"为己任,竭力传承中华文化,积极传播海外新知,其历经劫难又不断重生,创造了中国文化出版事业的
在历年高考英语试题中,阅读理解试题始终是一项最重要的考查内容,所占分数比重最大,已经成为 NMET 的主题。阅读理解是英语学习最终目的的体现,是英语的直接使用。因此,我们
<正> 由于按摩手法对人体各系统的影响,在解剖学、生物力学、血液流变学、生物化学各方面,都会产生不同程度的变化。这种变化,积极地促使人体内部的各种生理机能趋于正常状态
现在,很多离退休人员离退休之后,并不都是闲在家里,特别是有一技之长的离退休人员往往被返聘到单位上班或外出兼职,还有些离退休人员自己创业或对外投资等,离退休人员由此取
报纸