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果实采后贮藏期间，由于真菌引起的病害腐烂造成巨大的经济损失。扩展青霉Penicillium expansum是一种主要的采后病原真菌，它不但能够侵染多种果蔬产品，而且还能产生一种次生代谢毒素——棒曲霉素，影响食品安全、危害公众健康。因此，研究P.expansum棒曲霉素合成途径关键酶的催化功能，有助于深入了解棒曲霉素的合成机制，为有效控制棒曲霉素的污染提供新思路。本文利用生物化学、分子生物学、细胞生物学、代谢组学等研究方法研究探讨了与棒曲霉素合成相关基因的功能，为揭示棒曲霉素的合成机制提供了依据。 1棒曲霉素合成相关酶的功能的探索:利用底物饲喂的方法，推测出了6-甲基水杨酸合成酶（6-MSAS）、6-甲基水杨酸脱羧酶(6-MSAD)、间甲酚甲基羟基化酶(mCMH)、间羟基苯甲醇羟基化酶(mHAH)分别催化棒曲霉素合成的前四步反应。 2异源表达棒曲霉素合成途径关键酶，明确催化功能:在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中表达棒曲霉素合成途径的关键酶，并进行生物催化反应，结果表明6-MSAD可以将底物6-甲基水杨酸（6-MSA）催化为间甲酚(m-cresol)，mCMH可以将底物间甲酚催化为间羟基苯甲醇(m-Hydroxybenzylalcohol)，mHAH具有将底物间羟基苯甲醇催化为龙胆醇(gentisyl alcohol)的功能。 3棒曲霉素合成相关蛋白亚细胞定位的观察:在扩展青霉中表达了eGFP标记的棒曲霉素合成相关酶的融合蛋白，通过荧光观察显示，6-MSAD-eGFP、乙醇脱氢酶ALC-eGFP和未知蛋白Pre2-eGFP融合蛋白定位在细胞质中;异戊醇氧化酶IAO-eGFP和未知蛋白Pre1-eGFP融合蛋白定位在胞外基质;而mCMH-eGFP和mHAH-eGFP融合蛋白定位于细胞核周围的内质网中。