辣椒疫霉（Phytophthora capsici）和大豆疫霉（Phytophthora sojae）是疫霉菌中重要成员,不仅严重影响粮食安全,而且对经济社会造成了巨大损失。疫霉菌通过向寄主体内分泌大量的效应分子破坏其免疫反应,完成侵染。研究病原菌效应分子与寄主植物蛋白质互作,对于理解病原菌致病机制是至关重要的。本研究通过对辣椒疫霉和大豆疫霉中的3个效应分子进行互作蛋白的鉴定和具有特定结构域的效应分子功能初步探究,为进一步研究疫霉菌效应分子分子机制提供了基础。具体主要研究如下:大豆疫霉中PsCRN108互作蛋白的鉴定:疫霉菌中关于效应分子直接结合寄主植物DNA保守序列干扰其免疫反应的报道还是很少的。实验室前期研究发现,大豆疫霉中存在一种效应分子PsCRN108可以直接结合寄主植物HSP基因的启动子,抑制HSP基因的转录和翻译从而干扰HSP蛋白介导的植物免疫反应。本研究通过酵母双杂交筛库在大豆cDNA文库中对PsCRN108进行筛选,鉴定到84个候选蛋白,并从中挑选出18个候选蛋白进行酵母双杂交一对一验证,最终发现了 2个存在互作的蛋白质,分别为PUB23和CAMTA2。大豆疫霉中PsCRN78互作蛋白的鉴定:PsCRN78是大豆疫霉中具有分泌功能的效应分子,具有激酶结构域并可能通过抑制植物免疫反应参与对寄主的侵染过程。本研究发现PsCRN78对酵母具有毒性,无法利用酵母系统进行蛋白互作鉴定;继而我们通过对PsCRN78进行免疫沉淀及LC-MS/MS鉴定,并结合对稳定转化PsCRN78的拟南芥突变体的磷酸组数据分析,结果发现植物中的一类水通道蛋白PIP2;7与PsCRN78互作,因此推测其可能参与该效应分子的致病过程。辣椒疫霉中PcRxLR242互作蛋白的鉴定:PcRxLR242是在辣椒疫霉不同菌株中具有多态性的一类效应分子。前期研究发现,不同PcRxLR242同源物对寄主植物诱导细胞死亡的分化和植物抗性有一定程度的影响。我们通过本氏烟瞬时表达系统对PcRxLR242进行瞬时表达,并结合免疫沉淀及LC-MS/MS技术进行分析,结果发现本氏烟中有一类小G蛋白家族的Rab亚家族成员与RxLR242存在互作关系,并通过酵母双杂交一对一验证及荧光素酶互补实验进行验证,结果显示RxLR242与RabE有明显的互作关系。疫霉菌中DNA-binding活性的效应分子功能初探:为了探究疫霉菌效应分子中DNA-binding domain对寄主植物致病性的影响,前期研究通过生物信息手段对卵菌中DNA-binding的效应分子进行了预测,我们从中挑选10个候选效应分子进行初步研究,构建pBin-GFP 2植物表达载体,通过烟草叶片瞬时表达进行细胞定位观察;在瞬时表达候选效应分子的本氏烟叶片接种假单胞菌和辣椒疫霉,结果发现有三个候选效应分子表型发生变化,其中PcAvh92对寄主更抗病,PcCRN100对寄主更感病。