目的:目前治疗牙列缺损和缺失的首选方案是进行种植牙手术,对种植体表面进行改性能有效提高种植体与周围骨之间的骨结合。种植体表面可以通过影响分子间的相互作用、细胞的反应,进而影响骨的重塑,因此种植体植入后能否成功主要由种植体的表面性质来决定。非自体骨移植具有有限的骨诱导潜能,因此利用骨形态发生蛋白2等成骨因子修饰种植体引起人们研究兴趣。合成一种生物涂层复合体对种植体进行生物改性,并探究该复合体的稳定性、生物安全性和作为基因治疗载体的转染率。方法:1.制备BMP-2基因的过表达载体,并对产物进行酶切、凝胶电泳以验证BMP-2的c DNA序列是否成功导入质粒载体中。2.纳米羟基磷灰石制备方法选用的是化学沉淀法。制备好的材料选用以下仪器对其表征进行检测,包括透射电镜（Transmission electron microscope,TEM）、X-射线衍射（X-ray diffraction,XRD）、傅立叶变换红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR）。再使用化学法接枝RGD,并进行光电子能谱分析（Xray photoelectron spectrograph,XPS）,检测材料表面元素组成,并通过C元素峰拟合,分析C元素化学键存在形式。使用不同质量比的n HAP-RGD:BMP-2c DNA进行结合,选出最佳质量比,以便后续实验。3.使用DNase Ⅰ对n HAP-BMP-2c DNA-RGD复合体的抗核酸能力进行检测,测试其是否具有一定的稳定性;在BMSCs中加入不同浓度的复合体浸提液,以测定其细胞毒性。使用上述结果显示的对BMSCs无明显毒性的复合体浓度制备的浸提液,加入BMSCs中,培养1、3、5、7 d后,检测其对细胞增殖能力的影响;将复合体与BMP-2质粒、n HAP-RGD分别与细胞共同培养,通过实时荧光定量PCR方法检测细胞中BMP-2的m RNA表达量。结果:1.酶切、凝胶电泳实验的结果说明BMP-2基因的c DNA序列顺利连入质粒载体中,BMP-2过表达质粒构建成功。阳性克隆的测序结果显示在实验过程中基因未发生突变,该过表达质粒可以用于后续的实验。2.实验中合成的材料粉末经XRD、FTIR检测,结果显示材料与标准羟基磷灰石的XRD图谱高度一致,有较强HAP的特征峰存在,综合两个检测的结果可知合成的材料为羟基磷灰石。对TEM图片和XRD结果分析可得制备的材料为纳米级别。接枝完RGD后,通过C元素峰XPS拟合图可发现有新的化学键N-C=O形成,说明RGD成功接枝。对不同质量比的n HAP-RGD:BMP-2c DNA结合后发现,质量比为50:1时,BMP-2质粒即可被n HAP-RGD完全包裹,使用该质量比进行制备既能节约材料也能让BMP-2质粒最大程度负载到纳米材料上。3.n HAP-BMP-2c DNA-RGD复合体在DNase Ⅰ作用下,能保护DNA,未使其发生降解,具有良好的抗核酸降解能力,有一定的稳定性。当细胞液中复合体浓度低于0.5 mg/m L时,细胞损伤率小于20%,对细胞无明显毒性,具有良好的生物安全性;浓度为0.125 mg/m L、0.375 mg/m L时,对细胞增殖无明显抑制,具有良好的生物相容性。与BMP-2质粒、n HAP-RGD和未处理对照组相比较,使用n HAPBMP-2c DNA-RGD复合体负载BMP-2基因,与BMSCs共培养后,细胞中BMP-2的m RNA表达量明显增加,p<0.001,差异具有明显的统计学意义。结论:合成的n HAP-BMP-2c DNA-RGD复合体材料具有稳定性,一定浓度的复合体材料具有良好的生物安全性和生物相容性,复合体材料能有效提高BMP-2的m RNA表达量。因此实验中合成的材料具备改善种植体周围的骨结合的能力,具有成为种植体生物涂层材料的潜能。