背景:结直肠癌（Colorectal cancer,CRC）是最常见的消化道肿瘤之一,威胁患者生存质量且引起了严重的社会和医疗负担。现阶段的治疗手段很难从根本上抑制CRC的病理进展。因此,进一步深入探索CRC发生发展的分子机制对CRC的早期诊断和干预具有重要的科学意义和临床价值。RHBDF1与许多肿瘤的发生发展密切有关,但其在CRC中的潜在作用及相关机制尚未完全明确。目的:本项目拟首先检测菱形家族-1（Rhomboid family-1,RHBDF1）在CRC及癌旁组织中的表达水平并探索RHBDF1与CRC患者临床病理特征及预后之间的关系。进一步,通过干扰及过表达RHBDF1从细胞、动物及分子机制水平探索RHBDF1在CRC中的作用及潜在分子机理,为CRC的早期诊断和治疗提供新的分子靶点及实验依据,也为后续研发新的CRC靶向化疗药物提供理论依据。方法:利用免疫组化检测120例CRC癌灶及相应癌旁组织中的RHBDF1的表达水平,并探索RHBDF1与CRC患者临床病理特征及预后之间的关系。同时,利用q RT-PCR及western blot检测RHBDF1在CRC及癌旁组织表达情况。我们通过western blot检测RHBDF1在CRC细胞株中的表达水平,随后构建干扰及过表达RHBDF1稳转细胞株。在这些稳转细胞株中,我们通过CCK8、平板克隆实验、划痕实验、Transwell检测RHBDF1对CRC细胞增殖、侵袭迁移的影响。随后通过western blot及免疫荧光实验检测RHBDF1对CRC细胞EMT相关标志物的影响。我们也检测了RHBDF1对Wnt/β-catenin信号通路蛋白及其下游相关蛋白的表达情况。进一步,我们通过设计挽救实验,在同时干扰或过表达RHBDF1及APC的情况下检测RHBDF1通过APC调控Wnt/β-catenin信号通路相关分子表达。最后,我们通过裸鼠成瘤模型在体内水平检测RHBDF1对CRC皮下成瘤能力的影响。结果:免疫组化检测提示RHBDF1在CRC组织中的表达水平较癌旁组织显著增加。q RT-PCR及western blot检测结果也提示RHBDF1在CRC组织中高表达。RHBDF1表达与CRC肿瘤大小、淋巴结转移、T分期及患者生存显著相关。生存分析结果提示:高表达RHBDF1的CRC患者,总生存率更差。Western blot结果提示:RHBDF1在HCT116及LOVO细胞株中高表达,而在SW480 and SW620细胞株低表达。我们使用HCT116及LOVO细胞株构建干扰RHBDF1稳转株,而使用SW480及SW620细胞株构建过表达RHBDF1稳转株。在高表达RHBDF1的HCT116及LOVO细胞株中干扰RHBDF1后,显著抑制细胞增殖,侵袭迁移能力;而在低表达RHBDF1的SW480和SW620细胞株中过表达RHBDF1后,显著促进细胞增殖、侵袭迁移能力。同时,干扰RHBDF1减少Vimentin和N-cadherin表达,增加E-cadherin表达;而过表达RHBDF1产生相反的效应。进一步,通过western blot检测RHBDF1对Wnt/β-catenin信号通路及其下游相关蛋白的表达,我们发现:干扰RHBDF1减少总β-catenin及核内β-catenin表达水平,也抑制其下游相关蛋白（Twist,c-myc,Cyclin D1,TCF4及MMP-14）表达,而过表达RHBDF1产生相反效应。挽救实验结果提示:干扰RHBDF1减少总β-catenin及核内β-catenin表达水平,同时也抑制Twist,c-myc,Cyclin D1,TCF4及MMP-14的表达;但是在干扰RHBDF1的同时,沉默APC能部分逆转上述蛋白的表达趋势。过表达RHBDF1增加总β-catenin、核内β-catenin、Twist、c-myc、Cyclin D1、TCF4及MMP-14的表达;但是在过表达RHBDF1的同时,过表达APC能部分逆转上述蛋白的表达趋势。最后,我们通过裸鼠皮下成瘤模型证实:干扰RHBDF1可显著抑制裸鼠皮下瘤体生长,而过表达RHBDF1起到相反效应。结论:RHBDF1在CRC组织中的表达较癌旁组织显著增高;RHBDF1促进CRC细胞增殖,侵袭迁移及EMT;RHBDF1通过Wnt/β-catenin信号通路促进CRC细胞增殖,侵袭迁移及EMT;RHBDF1通过APC调控Wnt/β-catenin信号通路影响CRC的恶性生物学行为;RHBDF1在体内水平促进CRC增殖。